シグナル認識粒子（SRP）の生合成には、SRPタンパク質の核小体への取り込み、SRP-RNAとの結合、Xpo1pを介した排出が含まれる

信号認識粒子（SRP）は、初期の分泌タンパク質をERに標的としますが、SRPの組み立て方法と場所はほとんど不明です。ここでは、すべての成分を局在化することにより、RNA分子（SCR1）と6つのタンパク質で構成される酵母SRPの生合成を分析します。SCR1は野生型細胞では細胞質ですが、4つのSRP「コアタンパク質」SRP14P、SRP21P、SRP68P、またはSRP72Pのいずれかを欠く細胞で核局在化が観察されました。一貫して、これらのタンパク質について主要な核小体プールが検出されました。一方、Sec65pは核形成と核小体の両方で見つかりましたが、Srp54pは主に細胞質でした。核小体へのコアタンパク質の輸入には、リボソームタンパク質輸入受容体PSE1PおよびKAP123P/YRB4Pが必要であるため、核小体輸入経路を構成する可能性があります。SCR1の核輸出は、核輸出シグナル受容体XpO1pによって媒介され、mRNA輸送とは異なり、DIS3/RRP44エキソソーム成分変異体でのSCR1の核小体の蓄積、無傷のSCR1 3 '末端で証明されるように、必要です。NSP1PおよびNUP159P（RAT7P）を含むヌクレオポリンのサブセットも、核から細胞質へのSCR1を効率的に転座するために必要です。SRPのアセンブリには、すべてのSRPコアタンパク質を核小体にインポートし、そこでSCR1を使用してPre-SRPに組み立てることが必要であることを提案します。この粒子は、核細孔を標的とすることができ、その後、XPO1P依存的に細胞質に輸出されます。

The signal recognition particle (SRP) targets nascent secretory proteins to the ER, but how and where the SRP assembles is largely unknown. Here we analyze the biogenesis of yeast SRP, which consists of an RNA molecule (scR1) and six proteins, by localizing all its components. Although scR1 is cytoplasmic in wild-type cells, nuclear localization was observed in cells lacking any one of the four SRP "core proteins" Srp14p, Srp21p, Srp68p, or Srp72p. Consistently, a major nucleolar pool was detected for these proteins. Sec65p, on the other hand, was found in both the nucleoplasm and the nucleolus, whereas Srp54p was predominantly cytoplasmic. Import of the core proteins into the nucleolus requires the ribosomal protein import receptors Pse1p and Kap123p/Yrb4p, which might, thus, constitute a nucleolar import pathway. Nuclear export of scR1 is mediated by the nuclear export signal receptor Xpo1p, is distinct from mRNA transport, and requires, as evidenced by the nucleolar accumulation of scR1 in a dis3/rrp44 exosome component mutant, an intact scR1 3' end. A subset of nucleoporins, including Nsp1p and Nup159p (Rat7p), are also necessary for efficient translocation of scR1 from the nucleus to the cytoplasm. We propose that assembly of the SRP requires import of all SRP core proteins into the nucleolus, where they assemble into a pre-SRP with scR1. This particle can then be targeted to the nuclear pores and is subsequently exported to the cytoplasm in an Xpo1p-dependent way.