環状ヌクレオチド依存性チャネルの開口部に結合したS6の立体構造の変化

環状ヌクレオチド溶質チャネル（CNG）では、カルボキシ末端領域における環状ヌクレオチドの直接結合は、細孔の開口にアロステリックに結合されています。CNG1チャネルポアは、部位指向のシステイン置換を使用して、チャネルの開口部に関連する立体構造の変化を解明しました。システイン修飾が浸透に及ぼす影響は、CNGとKCSAの毛穴の間の構造的相同性を示唆しています。チャネルが閉じているが、開いた状態ではない場合、ヘリックスバンドルのS399C残基の間に、共和能間ジスルフィド結合が自然に形成されることがわかりました。一方、細孔透過残基のMTSET修正は状態依存であったが、内側前庭でのV391CのAg（+）修飾は、開いた状態と閉じた状態の両方で同じ拡散制限速度で発生した。我々の結果は、ヘリックスバンドルがゲーティングに関連する立体構造の変化を受けるが、CNGチャネルのアクティベーションゲートではないことを示唆しています。

In cyclic nucleotide-gated channels (CNG), direct binding of cyclic nucleotides in the carboxy-terminal region is allosterically coupled to opening of the pore. A CNG1 channel pore was probed using site-directed cysteine substitution to elucidate conformational changes associated with channel opening. The effects of cysteine modification on permeation suggest a structural homology between CNG and KcsA pores. We found that intersubunit disulfide bonds form spontaneously between S399C residues in the helix bundle when channels are in the closed but not in the open state. While MTSET modification of pore-lining residues was state dependent, Ag(+) modification of V391C, in the inner vestibule, occurred at the same diffusion-limited rate in both open and closed states. Our results suggest that the helix bundle undergoes a conformational change associated with gating but is not the activation gate for CNG channels.