ワクシニアウイルスベクターによって生成された組換えタンパク質は、ビリオン（IMV形式）内に異なるコンパートメントに組み込むことができます

ワクシニアウイルス（VV）は、最大かつ最も複雑な動物ウイルスの1つであり、約100の異なるポリペプチドを含むビリオンを備えています。ウイルスタンパク質のアセンブリは、2つの感染型の形成、エンベロープを備えた豊富な細胞内成熟ウイルス（IMV）、およびトランスゴルジネットワークから獲得した余分な膜を備えた豊富な細胞外封筒（EEV）を導く離散細胞質部位で発生します。ただし、EEVはおそらく細胞からのウイルス放出中に獲得された外膜細胞タンパク質に含まれているが、IMVはアセンブリ中に宿主タンパク質を除外することが示されています。目的の遺伝子を発現するVV組換え（VVR）は、病原体や癌に対する潜在的なワクチンとしての候補であるため、VVRが形態形成中に外来タンパク質を獲得できるかどうかを知ることが重要になります。この調査では、VVRからの精製されたビリオン（IMV）がウイルス粒子の異なる部位に外来タンパク質を組み込むことができることを示しています。洗剤を伴うビリオンコンパートメントの連続的な分別により、タンパク質マトリックス様膜の一部（ENVのHIV-1 GP41）の一部として、脂質エンベロープ（サイトカインIL-12およびCS YoeliiのCS抗原）の外来タンパク質が見つかりました。異なる分離株からのHIV-1 envのV3ループ、およびベータガラクトシダーゼ）。同様の発見は、WR株に由来する精製されたビリオンと、高度に減衰した修飾ワクチニアウイルスアンカラ（MVA）株に由来することで観察されました。これらの観察結果は、VVRが臨床試験または他のワクチン接種アプローチで使用される場合に考慮する必要があります。

Vaccinia virus (VV) is one of the largest and most complex of animal viruses, with a virion that contains about 100 different polypeptides. Assembly of the viral proteins occurs in discrete cytoplasmic sites leading to formation of two infectious forms, an abundant (>90%) intracellular mature virus (IMV) with an envelope, and a minor extracellular enveloped virus (EEV) with an extra membrane acquired from the trans-Golgi network. It has been shown that while EEV contains in the outer membrane cellular proteins probably acquired during virus release from cells, however, IMV exclude host proteins during assembly. Since VV recombinants (VVr) expressing genes of interest are candidates as potential vaccines against pathogens and cancer, it becomes important to know if VVr can acquire foreign proteins during morphogenesis. In this investigation we show that purified virions (IMVs) from VVr can incorporate foreign proteins into different sites in the virus particle. By sequential fractionation of virion compartments with detergents, we found foreign proteins in the lipid envelope (cytokine IL-12 and CS antigen of Plasmodium yoelii), as part of a protein matrix-like membrane (HIV-1 gp41 of env), or more closely associated with the core containing the DNA complexes (HIV-1 gp160; a multiepitopic protein with the V3 loop of HIV-1 Env from different isolates, and beta-galactosidase). Similar findings were observed with purified virions derived from the WR strain as well as from the highly attenuated modified vaccinia virus Ankara (MVA) strain. These observations should be taken into consideration when VVr are used in clinical trials or in other vaccination approaches.