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腎臓では、上皮Na+チャネル（ENAC）は、嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンスレギュレーター（CFTR）と高度な相同性を共有し、さまざまな準備でENACを修正するABCタンパク質であるSulfonyLurea受容体（SUR）と共発現しています。SURとENACの間の可能性のある規制関係を調査するために、アミロライド感受性電流（Deltaiami）についてアッセイされたアフリカアキュニアレヴィス卵母細胞に関する共発現研究を実施しました。さらに、化学発光アッセイを使用して、細胞外ヘマグルチニンタグ付きSur1（Sur1-HA）またはHAタグ付きENAC（ENAC-HA）の表面発現を調査しました。Sur1/ENAC（またはSur2B/ENAC）との共吸射卵母細胞では、ENAC単独で注入された一致した対照卵母細胞で測定されたDeltaiamiと比較して、53％（または45％と一致）と一致して減少しました。Deltaiamiに対するSURの阻害効果は、C末端が切り捨てられたサブユニットでENACを発現する卵母細胞に保存されていました。SURSの共発現は、ジアゾキシド、ピナシジル、トルブタミド、またはグリベンクラミドに対するデルタアミの感度を付与しませんでした。ENACは、sur1-HAの表面発現を促進しません。Sur1-HAは、ER-RETENTION/回収信号によって小胞体（ER）に保持されることが知られています。この信号を欠く変異体であるSur1-Haaaaは、依然としてENAC電流を阻害します。化学発光は、ENAC-HA単独を発現するコントロール卵母細胞の共発現卵母細胞の共発現卵母細胞の49％と一致することにより減少しました。SURは、原形質膜のレベルでENACと相互作用しないが、チャネルの表面発現を減らすことでデルタイアミを阻害すると結論付けています。
腎臓では、上皮Na+チャネル（ENAC）は、嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンスレギュレーター（CFTR）と高度な相同性を共有し、さまざまな準備でENACを修正するABCタンパク質であるSulfonyLurea受容体（SUR）と共発現しています。SURとENACの間の可能性のある規制関係を調査するために、アミロライド感受性電流（Deltaiami）についてアッセイされたアフリカアキュニアレヴィス卵母細胞に関する共発現研究を実施しました。さらに、化学発光アッセイを使用して、細胞外ヘマグルチニンタグ付きSur1（Sur1-HA）またはHAタグ付きENAC（ENAC-HA）の表面発現を調査しました。Sur1/ENAC（またはSur2B/ENAC）との共吸射卵母細胞では、ENAC単独で注入された一致した対照卵母細胞で測定されたDeltaiamiと比較して、53％（または45％と一致）と一致して減少しました。Deltaiamiに対するSURの阻害効果は、C末端が切り捨てられたサブユニットでENACを発現する卵母細胞に保存されていました。SURSの共発現は、ジアゾキシド、ピナシジル、トルブタミド、またはグリベンクラミドに対するデルタアミの感度を付与しませんでした。ENACは、sur1-HAの表面発現を促進しません。Sur1-HAは、ER-RETENTION/回収信号によって小胞体（ER）に保持されることが知られています。この信号を欠く変異体であるSur1-Haaaaは、依然としてENAC電流を阻害します。化学発光は、ENAC-HA単独を発現するコントロール卵母細胞の共発現卵母細胞の共発現卵母細胞の49％と一致することにより減少しました。SURは、原形質膜のレベルでENACと相互作用しないが、チャネルの表面発現を減らすことでデルタイアミを阻害すると結論付けています。
In the kidney the epithelial Na+ channel (ENaC) is co-expressed with the sulfonylurea receptor (SUR), an ABC protein that shares a high degree of homology with the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) and reportedly modifies ENaC in various preparations. To investigate a possible regulatory relationship between SUR and ENaC, we performed co-expression studies on Xenopus laevis oocytes, which were assayed for amiloride-sensitive currents (DeltaIami). Moreover, a chemiluminescence assay was used to investigate the surface expression of extracellular hemagglutinin-tagged SUR1 (SUR1-HA) or HA-tagged ENaC (ENaC-HA). In oocytes co-injected with SUR1/ENaC (or SUR2B/ENaC) DeltaIami was reduced by congruent with 53% (or congruent with 45%) compared to DeltaIami measured in matched control oocytes injected with ENaC alone. The inhibitory effect of SUR on DeltaIami was preserved in oocytes expressing ENaC with C-terminally truncated subunits. Co-expression of SURs did not confer sensitivity of DeltaIami to diazoxide, pinacidil, tolbutamide, or glibenclamide. ENaC does not facilitate the surface expression of SUR1-HA, which is known to be retained in the endoplasmatic reticulum (ER) by an ER-retention/retrieval signal. SUR1-HAAAA, a mutant that lacks this signal, still inhibits ENaC currents. Chemiluminescence was reduced by congruent with 49% in oocytes co-expressing ENaC-HA/SUR1 compared to that in control oocytes expressing ENaC-HA alone. We conclude that SUR does not interact with ENaC at the level of the plasma membrane but that it inhibits DeltaIami by reducing surface expression of the channel.
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