抗体によるインターフェロンの中和Iさまざまなバイオアッセイシステムにおける中和反応の定量的および理論分析

サイトカインまたは他の治療タンパク質の生物学的活性を阻害する抗体の非常に特異的な能力は、研究で広く使用されており、臨床的重要性が高まっています。理論的および実用的な考慮事項に基づいて、中和抗体効力の報告に対する標準化されたアプローチに対する標準化されたアプローチが存在し、実験データによってテストされます。インターフェロン（IFN）の中和の理論的および機能的側面に関するカワードの最初の研究に従って、実験データは、さまざまな方法論を使用して、IFN中和反応の性質に関する2つの仮説に対処するために、さまざまな方法論を採用するさまざまな研究所によって得られました。ほとんどのバイオアッセイのエンドポイントである10の実験室ユニット（Lu）/mlから1 Lu/mlに還元されるための中和電力の発現。2つの仮説が提起されます：（1）抗体は、生物学的に活性なIFN分子の固定量を中和するように作用します。または（2）抗体は、追加/残留生物学的に活性IFNの設定比でIFN活性を低下させます。最初の、または固定量の仮説は、抗原の等極量を中和する高親和性抗体の反応性に関連していますが、2番目または一定の割合では、総加算されたIFNの残留活性IFN分子の比率の減少が仮定されます。低親和性抗体が示す可能性があります。IFN-alphaおよびIFN-betaの中和のデータの分析が提示され、ヒトポリクローナル抗体とマウスモノクローナル抗体（mAb）を使用しています。Kawadeの理論的構成は付録に拡張され、テキストの新しい実験データと相関しています。データは、バイオアッセイがIFNに敏感である場合、高抗体親和性ではなく、低抗体親和性、一定の割合仮説、固定量仮説が適用されることを明確に示しています。ここおよび次の論文（pp。743-755、この問題）で提示された調査結果は、中和効力の標準化された表現方法の基礎を提供し、世界の健康が推奨する初期の運用10/1 Lu/mlアプローチを実証します組織。付随する論文は、中和結果をIFNに対するバイオアッセイの感度に関連付け、抗体中和の推奨単位の理論的根拠を説明しています。

The highly specific ability of antibodies to inhibit the biologic activity of cytokines or other therapeutic proteins is widely used in research and a subject of increasing clinical importance. The need exists for a standardized approach to the reporting of neutralizing antibody potency soundly based on theoretical and practical considerations and tested by experimental data. Pursuant to the original studies of Kawade on the theoretical and functional aspects of neutralization of interferons (IFN), experimental data were obtained by different laboratories employing varied methodology to address two hypotheses concerning the nature of IFN neutralization reactions, based on a derived formula that allows expression of neutralizing power as the reduction of 10 laboratory units (LU)/ml to 1 LU/ml, the end point of most bioassays. Two hypotheses are posed: (1) antibody acts to neutralize a fixed amount of biologically active IFN molecules, or (2) antibody reduces IFN activity in a set ratio of added/residual biologically active IFN. The first, or fixed amount, hypothesis relates to the reactivity of high-affinity antibodies neutralizing equimolar amounts of antigen, whereas the second, or constant proportion, hypothesis postulates a reduction in the ratio of total added IFN to residual active IFN molecules, such as a low-affinity antibody might exhibit. Analyses of data of the neutralization of IFN-alpha and IFN-beta are presented, employing human polyclonal antibodies and murine monoclonal antibodies (mAb). The theoretical constructs of Kawade are extended in the Appendix and correlated with new experimental data in the text. The data clearly indicate that the low-antibody affinity, constant proportion hypothesis, rather than the high-antibody affinity, fixed amount hypothesis, is applicable, if the bioassay is sensitive to IFN. The findings presented here and in the following paper (pp. 743-755, this issue) taken together provide the basis for a standardized method of expression of neutralizing potency and substantiate the earlier operational 10/1 LU/ml approach recommended by the World Health Organization. The accompanying paper relates neutralization results to the sensitivity of the bioassay to IFN and describes the rationale for a recommended unit of antibody neutralization.