Procollagen Peptidase：ネイティブ基質に対するその作用様式

コラーゲンペプチダーゼは、硫酸アンモニウムによる沈殿により、ヒトおよびマウスの線維芽細胞培養培地から回収されました。in vitro酵素反応の試験基質は、ヒト線維芽細胞培養の媒体から調製した放射性標識、ジスルフィド結合プロコラーゲンでした。酵素消化物は、ポリアクリルアミドの電気泳動によって分析されました。ヒトとマウスの酵素は基質と反応して、同じ中間体と最終製品を生成しました。コラーゲンペプチダーゼは、3つのプロコラーゲン鎖のそれぞれを順番に切断するエンドペプチダーゼとして作用します。反応の最終生成物は、コラーゲンとコラゲンの非肝系膜皮質残基に由来する3鎖、ジスルフィド結合フラグメントです。

Procollagen peptidase was recovered from the medium of human and mouse fibroblast cultures by precipitation with ammonium sulfate. The test substrate for the in vitro enzymatic reaction was radioactively-labeled, disulfide-linked procollagen prepared from the medium of human fibroblast cultures. The enzymatic digests were analyzed by electrophoresis in polyacrylamide gets containing sodium dodecyl sulfate and urea. The human and mouse enzymes reacted with the substrate to generate the same intermediates and final products. Procollagen peptidase acts as an endopeptidase which cleaves each of the three procollagen chains in turn. The final products of the reaction are collagen and a three-chain, disulfide-linked fragment derived from the nonhelical aminoterminal residues of procollagen.