緑茶カテキンの抗血小板活性は、細胞質カルシウムの増加の阻害によって媒介されます

以前に、緑茶カテキン（GTC）が強力な抗血栓活性を示すことを報告しました。現在の研究では、GTCの抗血小板メカニズムを調査しました。GTCのヒト血小板の凝集、およびフルオレセインイソチオシアン酸結合フィブリノーゲンのヒト血小板糖タンパク質（GP）IIB/IIIAへの結合に対する効果をテストしました。GTCは、洗浄したヒト血小板のコラーゲン、トロンビン、アデノシン二リン酸（ADP） - 、およびカルシウムイオノフォアA23187誘導凝集を阻害し、それぞれ0.64、0.52、0.63、および0.45 mg/MLの50％阻害濃度値を抑制しました。GTCは、ヒト血小板表面GPIIB/IIIA複合体へのフィブリノーゲンの結合を有意に阻害しましたが、精製されたGPIIB/IIIA複合体への結合を阻害できませんでした。これらの結果は、GTCの抗血小板活性が、GPIIB/IIIA複合体暴露に先行する細胞内経路の阻害による可能性があることを示しています。また、血小板の活性化状態を決定し、Ca（2+） - ATPaseポンプの選択的阻害剤であるThapsigarginによる血小板凝集の誘導に際に重要な細胞内カルシウムレベルに対するGTCの効果を調査しました。GTCによるヒト血小板の前処理は、トロンビン治療によって誘導される細胞内Ca（2+）濃度の上昇を著しく阻害し、GTCはタプシガルギン誘発性血小板凝集を有意に阻害しました。また、2番目のメッセンジャーであるイノシトール1,4,5三リン酸（IP（3））に対するGTCの効果を調べました。GTCは、トロンビンによって誘発されるホスホイノシチド分解を有意に阻害しました。まとめると、これらの観察結果は、GTCの抗血小板活性が細胞質カルシウムの増加の阻害によって媒介されることを示唆しており、Ca（2+）-ATPaseおよびIPの阻害を介したフィブリノーゲンGPIIB/IIIA結合の阻害につながります（3）形成。

We have previously reported that green tea catechins (GTC) display a potent antithrombotic activity, which might be due to antiplatelet rather than anticoagulation effects. In the current study, we investigated the antiplatelet mechanism of GTC. We tested the effects of GTC on the aggregation of human platelets and on the binding of fluorescein isothiocyanate-conjugated fibrinogen to human platelet glycoprotein (GP) IIb/IIIa. GTC inhibited the collagen-, thrombin-, adenosine diphosphate (ADP)-, and calcium ionophore A23187-induced aggregation of washed human platelets, with 50% inhibitory concentration values of 0.64, 0.52, 0.63, and 0.45 mg/ml, respectively. GTC significantly inhibited fibrinogen binding to human platelet surface GPIIb/IIIa complex but failed to inhibit binding to purified GPIIb/IIIa complex. These results indicate that the antiplatelet activity of GTC may be due to inhibition of an intracellular pathway preceding GPIIb/IIIa complex exposure. We also investigated the effects of GTC on intracellular calcium levels, which are critical in determining the activation status of platelets and on induction of platelet aggregation by thapsigargin, which is a selective inhibitor of the Ca(2+)-ATPase pump. Pretreatment of human platelets with GTC significantly inhibited the rise in intracellular Ca(2+) concentration induced by thrombin treatment, and GTC significantly inhibited the thapsigargin-induced platelet aggregation. We also examined the effect of GTC on the second messenger, inositol 1,4,5-triphosphate (IP(3)). GTC significantly inhibited the phosphoinositide breakdown induced by thrombin. Taken together, these observations suggest that the antiplatelet activity of GTC is be mediated by inhibition of cytoplasmic calcium increase, which leads to the inhibition of fibrinogen-GPIIb/IIIa binding via the activation of Ca(2+)-ATPase and inhibition of IP(3) formation.