IL-6はアポトーシスを阻害し、抗アポトーシス遺伝子MCl-1のアップレギュレーションを通じてヒト胃癌AGS細胞の酸化的DNA病変を保持します

アポトーシスは、集団から最も大きな損傷した細胞を選択的に除去することにより、ゲノムの完全性を維持する上で重要な役割を果たします。反応性酸素種（ROS）および特定の炎症性サイトカインは、ヒト発がんプロセス中に常に上昇します。しかし、ROSと炎症性サイトカインの間の相互作用の生物学的意義はとらえどころのないままです。この研究は、インターロイキン-6（IL-6）が過酸化水素（H（2））によって誘導されるアポトーシスから胃癌細胞を効果的に保護することを示しています。H（2）O（2）によって誘発された細胞死のシグナル伝達JNK経路も、IL-6によって阻害されます。さらに、他のBCL-2ファミリーメンバーではなく、MCL-1がIL-6によって24時間にわたって相当なレベルでアップレギュレートされたことがわかりました。さらに、MCL-1発現ベクターであるPCMV-MCL-1をAGS細胞にトランスフェクトし、いくつかのMCL-1過剰発現クローンを正常に取得しました。フローサイトメトリー分析は、これらのMCL-1過剰発現AGS細胞が、NEOコントロールAGS細胞と比較した場合、H（2）O（2）によって誘導されるアポトーシスにより耐性があることを示しています。一貫して、H（2）O（2）によって誘導されるJNK経路の活性化は、MCL-1過剰発現細胞でもブロックされています。これらの結果は、IL-6の抗アポトーシス効果は、少なくとも部分的にはMCL-1のアップレギュレーションによるものであることを示しています。驚いたことに、IL-6曝露またはMCL-1の過剰発現のいずれかは、H（2）O（2）によってトリガーされるAGS細胞の細胞内過酸化物のレベルを低下させることができません。この研究では、H（2）O（2）で処理した後のIL-6処理AGS細胞の酸化的DNA病変の指標である8-ヒドロキシジグアノシン（8-OH-DGUA）のレベルも決定されました。特に、我々の結果は、IL-6治療なしでAGS細胞で8-OH-DGUAの大部分が効率的に除去されているのに対し、8-OH-DGUAの約50％のみがIL-6処理AGで修復されたことを示しています。24時間後のセル。同様に、8-OH-DGUAの約60〜70％も修復に失敗し、MCL-1トランスフェクタントのゲノムDNAに保持されました。この研究の結果は、IL-6によるMCL-1タンパク質のアップレギュレーションがアポトーシスをオーバーライドすることによりH（2）O（2）誘導酸化DNA病変に対する感受性を高める可能性があるという新しいメカニズムを提供します。

Apoptosis plays a critical role in maintaining genomic integrity by selectively removing the most heavily damaged cells from the population. Reactive oxygen species (ROS) and certain inflammatory cytokines are always elevated during the human carcinogenic process. However, the biological significance of the interplay between ROS and inflammatory cytokine remains elusive. This study demonstrates that interleukin-6 (IL-6) effectively protects gastric cancer cells from the apoptosis induced by hydrogen peroxide (H(2)O(2)). The cell death signaling JNK pathway elicited by H(2)O(2) is also inhibited by IL-6. We further found that Mcl-1, but not other Bcl-2 family members, was up-regulated by IL-6, by a substantial level over 24 h. We further transfected a mcl-1 expression vector, pCMV-mcl-1, into the AGS cells, and successfully obtained several mcl-1-overexpressing clones. Flow cytometric analysis shows that these mcl-1-overexpressing AGS cells are more resistant to the apoptosis induced by H(2)O(2) when compared with the neo control AGS cells. Consistently, the activation of the JNK pathway induced by H(2)O(2) is also blocked in mcl-1-overexpressed cells. These results indicate that the anti-apoptotic effect of IL-6 is, at least in part, due to the up-regulation of mcl-1. To our surprise, either IL-6 exposure or mcl-1 overexpression fails to reduce the level of intracellular peroxides in the AGS cells triggered by H(2)O(2). This study also determined the level of 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OH-dGua), an indicator for oxidative DNA lesions in IL-6-treated or mcl-1-overexpressed AGS cells after treatment with H(2)O(2). Notably, our results indicate that a majority of the 8-OH-dGua is efficiently removed in the AGS cells without IL-6 treatment, whereas only approximately 50% of the 8-OH-dGua was repaired in the IL-6-treated AGS cells after 24 h. Similarly, approximately 60-70% of the 8-OH-dGua also failed to repair and was retained in the genomic DNA of the mcl-1 transfectants. Results in this study provide a novel mechanism by which up-regulation of the Mcl-1 protein by IL-6 may enhance the susceptibility to H(2)O(2)-induced oxidative DNA lesions by overriding apoptosis.