海の胃の動きにおけるBrachyury（t）の役割ウリチンlytechinus variegatus

ここで説明されている研究は、ウニ胚形成中に発生する胃の動きと形態形成運動に関与する遺伝子を特定し、特徴付けようとしました。Tボックスファミリー転写因子であるBrachyuryのオーソログは、候補遺伝子アプローチを通じてクローン化されました。Brachyury（T）は、このTボックス転写因子ファミリーの創設メンバーであり、アフリカツメガエル、ゼブラフィッシュ、およびマウス胚形成の胃の動きに関与しています。タンパク質発現を特徴付けるために、ポリクローナル血清がLVBRACに生成されました。LVBRACは、最初に2つの異なる領域で間葉炎芽球の段階に現れ、胚発現はpluteus段階まで倒れる。植物、LVBRACの発現は内胚葉にあり、ブラストポアの周りに円周方向にあります。内胚葉細胞はその円周に移動するとLVBRACを発現し、周囲を離れる際にLVBRACの発現を止めるため、LVBRAC発現のこのトーラス型の領域はサイズが一定のままです。植物の表現は、プルテウスの段階を通して肛門の周りに残ります。LVBRAC発現の2番目のドメインは、最初に間葉球芽球の段階で口腔外胚葉に広く現れ、後の胚段階では、ストーマエルの開口部だけに洗練されています。植物LVBRACの発現は、マクロメアの自律的なベータカテニンシグナル伝達に依存しており、マイクロメアまたはVEG2誘導シグナルを必要としません。次に、両方の発現領域で発生する形態形成運動にLVBRACが必要であると判断されました。LVBRACのDNA結合ドメインをショウジョウバエに染み込んだ遺伝子の転写抑制モジュールに融合することにより、ドミナントインタファーリングコンストラクトが生成されました。このLVBRAC-ENコンストラクトをコードするmRNAのマイクロインジェクションは、内胚葉および中胚葉マーカー遺伝子の発現ではなく、胃の動きのブロックをもたらしました。さらに、LVBRAC-ENを2つの芽球体の1つに注入すると、注入された芽球に由来する組織の正常な胃変動が生じ、LVBRACの下流機能はウニ胃凝集中に非自律的である可能性があることを示しています。

The studies described here sought to identify and characterize genes involved in the gastrulation and morphogenetic movements that occur during sea urchin embryogenesis. An orthologue of the T-box family transcription factor, Brachyury, was cloned through a candidate gene approach. Brachyury (T) is the founding member of this T-box transcription factor family and has been implicated in gastrulation movements in Xenopus, zebrafish, and mouse embryogenesis. Polyclonal serum was generated to LvBrac in order to characterize protein expression. LvBrac initially appears at mesenchyme blastula stage in two distinct regions with embryonic expression perduring until pluteus stage. Vegetally, LvBrac expression is in endoderm and lies circumferentially around the blastopore. This torus-shaped area of LvBrac expression remains constant in size as endoderm cells express LvBrac upon moving into that circumference and cease LvBrac expression as they leave the circumference. Vegetal expression remains around the anus through pluteus stage. The second domain of LvBrac expression first appears broadly in the oral ectoderm at mesenchyme blastula stage and at later embryonic stages is refined to just the stomodael opening. Vegetal LvBrac expression depends on autonomous beta-catenin signaling in macromeres and does not require micromere or veg2-inductive signals. It was then determined that LvBrac is necessary for the morphogenetic movements occurring in both expression regions. A dominant-interfering construct was generated by fusing the DNA binding domain of LvBrac to the transcriptional repression module of the Drosophila Engrailed gene in order to perturb gene function. Microinjection of mRNA encoding this LvBrac-EN construct resulted in a block in gastrulation movements but not expression of endoderm and mesoderm marker genes. Furthermore, injection of LvBrac-EN into one of two blastomeres resulted in normal gastrulation movements of tissues derived from the injected blastomere, indicating that LvBrac downstream function may be nonautonomous during sea urchin gastrulation.