トレハロースとベタインを使用した長鎖cDNA合成のための非常に効率的な方法

全長cDNAを取得することは、cDNAライブラリーの構築やRACE-PCR（cDNA端の急速な増幅）などの多くの分子生物学的方法にとって重要です。逆転写にトレハロースと組み合わせてベタインだけを含めると、より長いcDNA合成産物が生じることがわかりました。リアルタイムPCRを備えた14 kbの長いクラリスリンmRNAに示されているように、2 mのベタインと0.6 mトレハロースの組み合わせは、長さ12.5 kbの長さでほぼ9倍のcDNAにつながります。これは、ベタインがRNAの二次構造を解決する能力によるものであり、それによりその融解温度が低下します。トレハロースと組み合わせたベタインの適用は、全長cDNAに依存するすべての実験方法で有用であることが証明されるはずです。（アメリカ合衆国）。

Obtaining full-length cDNA is important for many molecular biology methods like cDNA library construction or RACE-PCR (rapid amplification of cDNA ends). We have found that the inclusion of betaine alone and in combination with trehalose in reverse transcription results in longer cDNA synthesis products. As shown on the 14-kb long clarithrin mRNA with real-time PCR, a combination of 2 M betaine and 0.6 M trehalose leads to almost 9 times more cDNA with a length of 12.5 kb. This is due to the ability of betaine to resolve secondary structures of the RNA, thereby decreasing its melting temperature. The application of betaine in combination with trehalose should prove useful in all laboratory methods relying on full-length cDNA. (USA).