[サプレッサーTRNA遺伝子によるジストロフィン遺伝子のナンセンス変異の抑制]

ジストロフィン遺伝子のナンセンス変異は、患者の10〜15％のデュシェンヌ筋ジストロフィー（DMD）の原因です。このようなイベントでは、DMDの遺伝子治療へのアプローチの1つは、変異体mRNAの翻訳の早期終了を克服するための抑制性TRNAの使用です。ポリマーVSST-525複合体を使用して、SuptrNA遺伝子（pcDNA3SuptRNA）を含むコンストラクトとマーカーLACZ遺伝子（PNTLACZHIS）を使用して、HELA細胞培養の共輸送を実施しました。ベータガラクトシダーゼを生成する細胞の数は、suptrna遺伝子の用量に反比例することがわかった。Suptrnaochre遺伝子のMDXマウス筋肉への発現を提供する構築物の単一のin vivo注射により、繊維の2.5％でジストロフィンが産生されました。これは、サプレッサーTRNAがナンセンス変異によって引き起こされる遺伝性疾患の遺伝子治療に適用できることを示唆しています。

Nonsense mutations in the dystrophin gene are the cause of Duchenne muscular dystrophy (DMD) in 10-15% of patients. In such an event, one approach to gene therapy for DMD is the use of suppressor tRNAs to overcome the premature termination of translation of the mutant mRNA. We have carried out cotransfection of the HeLa cell culture with constructs containing a suptRNA gene (pcDNA3suptRNA) and a marker LacZ gene (pNTLacZhis) using their polymer VSST-525 complexes. It was found that the number of cells producing beta-galactosidase depends inversely on the dose of the suptRNA gene. A single in vivo injection of the construct providing for expression of the suptRNAochre gene into mdx mouse muscle resulted in the production of dystrophin in 2.5% of fibers. This suggests that suppressor tRNAs are applicable in gene therapy for hereditary diseases caused by nonsense mutations.