脾臓マクロファージではなく、リンパ節マクロファージは、高レベルの未覆いシアアロドヘシンを発現します：in vivoのマクロファージの接着特性への影響

Sialoadheininは、N-アセチルネルアミニルアルファ酸構造を認識するマクロファージ制限接着分子です。このオリゴ糖を運ぶ多価のネオグリタンパク質プローブを調製し、ネイティブラットマクロファージ上のシアロアドヘシンの結合活性を特徴づけました。腸間膜およびx窩リンパ節のマクロファージは、脾臓のものよりも36倍高い活性を示しました。2つの臓器のマクロファージへのプローブ結合のk（d）値は、見分けがつかなかった（1〜2 nm）でしたが、リンパ節マクロファージのB（最大）値は脾臓マクロファージのそれよりも著しく高かった。ウエスタンブロット分析により、リンパ節マクロファージに存在するシアロアルドヘシンの量は、脾臓マクロファージよりも25倍高いことが明らかになりました。リンパ節マクロファージ上のシアロアドヘシンの高い細胞表面発現も、フローサイトメトリーによって示されました。内因性のシアログリコンジュゲートによるシアロアルドヘシンの「マスキング」を調べるために、プローブ結合を測定する前にマクロファージをシアリダーゼで治療しました。シアリダーゼ処理後、脾臓マクロファージの結合活性は4倍に増加しましたが、リンパ節マクロファージの結合活性は増加しませんでした。結論として、リンパ節で高レベルのマスクされていないシアロアドヘシンを発現するマクロファージを特定しました。これらのマクロファージ上のマスクされていないフォームは、脾臓マクロファージの大部分のマスクされたフォームとは異なり、シアロアドヘシン依存性接着機能に使用できます。

Sialoadhesin is a macrophage-restricted adhesion molecule that recognizes N-acetylneuraminylalpha2-3galactose structure. We prepared a multivalent neoglycoprotein probe carrying this oligosaccharide and characterized the binding activity of sialoadhesin on native rat macrophages. Macrophages from mesenteric and axillar lymph nodes exhibited 36-fold higher activity than those from the spleen. The K(d) values of the probe binding to macrophages of the two organs were indistinguishable (1-2 nM), whereas the B(max) value of lymph node macrophages was markedly higher than that of splenic macrophages. Western blot analysis revealed that the quantity of sialoadhesin present in lymph node macrophages was 25-fold higher than in splenic macrophages. High cell surface expression of sialoadhesin on lymph node macrophages was also shown by flow cytometry. To examine the "masking" of sialoadhesin by endogenous sialoglycoconjugates, we treated macrophages with sialidase before measuring the probe binding. After sialidase treatment, the binding activity of splenic macrophages increased fourfold, whereas that of lymph node macrophages did not increase. In conclusion, we have identified macrophages expressing high levels of unmasked sialoadhesin in lymph nodes. The unmasked forms on these macrophages are available for sialoadhesin-dependent adhesive functions, unlike the masked forms on the majority of splenic macrophages.