P53の直接的なターゲットとしてのインターフェロン調節因子5遺伝子（IRF-5）の識別

インターフェロン調節因子（IRF）は、これらの標的へのDNA配列特異的結合を介してインターフェロン遺伝子の転写を調節します。野生型p53を含むアデノウイルスに感染したp53欠損細胞の遺伝子発現を調べるための微分表示方法を使用して、外因性p53の存在下でインターフェロン調節因子5（IRF-5）mRNAの発現が増加することがわかりました。電気泳動モビリティシフトアッセイは、IRF-5遺伝子のエクソン2で検出された潜在的なp53結合部位（p53bs）が実際にp53タンパク質に結合する可能性があることを示しました。さらに、異種レポーターアッセイは、p53Bがp53依存性転写活性を持っていることを明らかにしました。IRF-5の発現は、P53+/+細胞（MCF7およびNHDF）で誘導されましたが、野生型p53でのガンマ照射、UV放射、またはアドリアマイシン治療によってDNAが損傷した場合、INP53 - / - 細胞（H1299）では誘導されませんでした。- 依存する方法。これらの結果は、IRF-5が新規p53ターゲットであり、p53依存性免疫応答を媒介する可能性があることを示唆しています。

Interferon regulatory factors (IRFs) regulate transcription of interferon genes through DNA sequence-specific binding to these targets. Using a differential display method for examining gene expression in p53-defective cells infected with adenovirus containing wild-type p53, we found that expression of interferon regulatory factor 5 (IRF-5) mRNA was increased in the presence of exogenous p53. An electrophoretic mobility-shift assay showed that a potential p53 binding site (p53BS) detected in exon 2 of the IRF-5 gene could in fact bind to p53 protein. Moreover, a heterologous reporter assay revealed that the p53BS possessed p53-dependent transcriptional activity. Expression of IRF-5 was induced in p53+/+ cells (MCF7 and NHDF), but not inp53-/- cells (H1299) when DNA was damaged by gamma-irradiation, UV-radiation, or adriamycin treatment in a wild-type p53-dependent manner. These results suggest that IRF-5 is a novel p53-target, and that it might mediate the p53-dependent immune response.