敗血症中の一酸化窒素による白血球転がりの阻害は、活性微生物好中球の移動の減少につながります

セカルライゲーションと穿刺により誘発される、異なる程度の重症度、亜致死敗血症、致死敗血症の2つのモデルを開発しました。盲腸結紮と穿刺（L-CLP）によって誘発される致死敗血症は、感染部位への好中球の移動の失敗と高い死亡率をもたらしました。一酸化窒素（NO）合成酵素阻害剤であるアミノグアニジン（AG）による敗血症性動物の治療により、好中球の移動の失敗が妨げられ、動物が死から保護されました。しかし、L-CLPにさらされたサイトカイン誘発NOシンターゼ（INOS）欠損（INOS（ - / - ））マウスは好中球の移動不全を呈しませんでしたが、100％の致死性が発生しました。皮質結紮と穿刺（SL-CLP）によって誘導される亜皮膚敗血症にさらされたイノス（ - / - ）マウスも、好中球の移動が発生しているにもかかわらず高い死亡率を被りました。この見かけのパラドックスは、NOを産生できないために感染部位に存在するイノス（ - / - ）マウスにおける微生物活性の欠如によって説明できます。特に、SLおよびL-CLP INOS（ - / - ）マウスは、滲出液で高い細菌数を示しました。L-CLP野生型マウスでは、白血球転がり、接着、および移動の減少が観察されたため、NOによる好中球の移動の阻害は、好中球/内皮接着メカニズムの阻害によるものです。これらの応答はAG治療によって防止され、INOS（ - / - ）L-CLPグループでは観察されませんでした。L-CLPマウスからの好中球のL-セレクチン発現に有意な変化はありませんでした。したがって、白血球回転の減少は、INOS由来NOによって媒介される内皮表面上の接着分子の発現の欠陥によるものであるようです。結論として、結果は、好中球微生物活性におけるNOの重要性にもかかわらず、重度の敗血症でのその生成が白血球転がりと内皮への堅固な接着を阻害することにより好中球の移動を減少させ、結果として白血球の移動を損なうことと、その結果、彼らの基本的な役割を損なうことを示しています。ホスト細胞防御メカニズム。

We developed two models of sepsis with different degrees of severity, sublethal and lethal sepsis, induced by cecal ligation and puncture. Lethal sepsis induced by cecal ligation and puncture (L-CLP) resulted in failure of neutrophil migration to the infection site and high mortality. Treatment of septic animals with aminoguanidine (AG), a nitric oxide (NO) synthase inhibitor, precluded the failure of neutrophil migration and protected the animals from death. However, cytokine-induced NO synthase (iNOS)-deficient (iNOS(-/-)) mice subjected to L-CLP did not present neutrophil migration failure, but 100% lethality occurred. iNOS(-/-) mice subjected to sublethal sepsis induced by cecal ligation and puncture (SL-CLP) also suffered high mortality despite the occurrence of neutrophil migration. This apparent paradox could be explained by the lack of microbicidal activity in neutrophils of iNOS(-/-) mice present at the infection site due to their inability to produce NO. Notably, SL- and L-CLP iNOS(-/-) mice showed high bacterial numbers in exudates. The inhibition of neutrophil migration by NO is due to inhibition of a neutrophil/endothelium adhesion mechanism, since a reduction in leukocyte rolling, adhesion, and emigration was observed in L-CLP wild-type mice. These responses were prevented by AG treatment and were not observed in the iNOS(-/-) L-CLP group. There was no significant change in L-selectin expression in neutrophils from L-CLP mice. Thus, it seems that the decrease in leukocyte rolling is due to a defect in the expression of adhesion molecules on endothelial surfaces mediated by iNOS-derived NO. In conclusion, the results indicate that despite the importance of NO in neutrophil microbicidal activity, its generation in severe sepsis reduces neutrophil migration by inhibiting leukocyte rolling and their firm adhesion to the endothelium, in effect impairing the migration of leukocytes and consequently their fundamental role in host cell defense mechanisms.