ユビキチン相互作用モチーフ（UIM）は、EPS15およびEPS15Rユビキチン化に不可欠です

表皮成長因子（EGF）のシグナル伝達における重要なネガティブコントロールメカニズムは、活性化されたEGF受容体のエンドサイトーシスとその後の分解です。EPS15とその関連パートナーEPS15Rは、膜貫通受容体のクラスリンを介したエンドサイトーシスにおいて重要な役割を果たします。細胞のEGF刺激により、EPS15はチロシン残基でリン酸化され、モノビキチン化されました。EPS15のチロシンリン酸化はEGF受容体の内在化に関与していますが、EPS15ユビキチン化の機能は不明です。突然変異アプローチを使用して、EPS15とEPS15Rの2番目のユビキチン相互作用モチーフ（UIM）がユビキチン化に不可欠であることがわかりました。このUIMは、EPS15の最近特徴付けられた核輸出信号と部分的に重複しています。これらの2つの重複モチーフは、核輸出信号とユビキチン化信号活動に関して異なる構造要件を持っていることを示しています。我々のデータは、UIMにユビキチンアクセプター部位が含まれていないが、EPS15とEPS15Rの両方のモノユビキチン化につながるユビキチン化機械の募集部位として機能することを示しています。

An important negative control mechanism in the signaling of epidermal growth factor (EGF) is the endocytosis and subsequent degradation of activated EGF receptors. Eps15 and its related partner Eps15R play a key role in clathrin-mediated endocytosis of transmembrane receptors. Upon EGF stimulation of the cell, Eps15 becomes both phosphorylated on tyrosine residues and monoubiquitinated. Although tyrosine phosphorylation of Eps15 has been implicated in EGF receptor internalization, the function of Eps15 ubiquitination is not known. Using a mutational approach, we have found that the second ubiquitin-interacting motif (UIM) of Eps15 and Eps15R is essential for their ubiquitination. This UIM partially overlaps with the recently characterized nuclear export signal in Eps15. We show that these two overlapping motifs have different structural requirements with respect to nuclear export signal versus ubiquitination signal activity. Our data demonstrate that the UIM does not contain the ubiquitin acceptor site but functions as a recruitment site for the ubiquitination machinery leading to the monoubiquitination of both Eps15 and Eps15R.