小容量血漿サンプルにおける4-ヒドロキシノネナールの測定：臨床環境のためのガスクロマトグラフィーマス分光法の修正

4-ヒドロキシノン-2エナール（4-HNE）は、脂質過酸化の主要なアルデヒド産物（LPO）の1つであり、多くの病態生理学的プロセスに関与しています。LPO産物はin vivoでの酸化ストレスの有用な指標であるため、生体組織のLPO産物の多くの検出方法が開発されました。ただし、現在、これらの方法は臨床環境で使用されていません。LPO製品を臨床研究のバイオマーカーとして導入するために、4-HNE検出に適したGC-MS法が臨床要件を満たすように適応しました。1つの結果として、最小限のサンプル量を50ミクロールの血漿に減らすことができるため、この方法は小児目的に適している可能性があります。GC-MS 9,9,9-D（3）-4-Hydroxynon-2-Enalによる4-HNE検出に最適な内部標準（I.S.）は、Van Kuijk et al。によって導入されました。[肛門。Biochem。、224（1995）420]。ただし、入手可能性が限られているため、ベンズアルデヒドリングD（5）（5）、4-ヒドロキシベンズアルデヒド、および2,5-ジヒドロキシベンズアルデヒドがテストされ、代替手段が見つかりました。これら3つのうち、4-ヒドロキシベンツアルデヒドは、I.S。として最も役立つことが示されました。適応された方法の適用性を調べるために、保管中のサンプル中の4-HNEの安定性に関するテストが実行されました。4 -HNEの大きな損失を避けるために、血漿サンプルを-80度以下で保存する必要があることが示されました。生理学的レベルに近い4 -HNE濃度のサンプルは、-80度Cで22か月で安定していることが示されました。ほとんどの臨床環境で4-HNE測定を促進します。

4-Hydroxynon-2-enal (4-HNE) is one of the major aldehydic products of lipid peroxidation (LPO) and is involved in a number of pathophysiological processes. Since LPO products are useful indicators for oxidative stress in vivo, a number of detection methods for LPO products in biological tissues were developed. However, none of these methods is presently used in clinical settings. In order to introduce LPO products as biomarkers in clinical studies a suitable GC-MS method for 4-HNE detection was adapted to meet clinical requirements. As one result, the minimal sample volume could be decreased to 50 microl of plasma so that the method might even be suitable for pediatric purposes. The best internal standard (I.S.) for 4-HNE detection by GC-MS 9,9,9-D(3)-4-hydroxynon-2-enal was introduced by van Kuijk et al. [Anal. Biochem., 224 (1995) 420]. However, because of its limited availability, benzaldehyde-ring-d(5), 4-hydroxybenzaldehyde, and 2,5-dihydroxybenzaldehyde were tested to find an alternative. Out of these three, 4-hydroxybenzaldehyde was shown to serve best as I.S. To examine the applicability of the adapted method, tests on the stability of 4-HNE in samples during storage were carried out. It was shown that plasma samples need to be stored at -80 degrees C or less to avoid greater loss of 4-HNE. Samples with 4-HNE concentrations close to the physiological level were shown to be stable over 22 months at -80 degrees C. The introduction of a new and easily available I.S., reduction of the sample volume, and information about sample stability provided by this study facilitate 4-HNE determination in most clinical settings.