SRC相同性領域2ドメイン含有ホスファターゼ1は、B細胞リンカータンパク質とNCKとC-Jun NH2末端キナーゼの活性化を調節することにより、B細胞受容体誘導アポトーシスを積極的に調節します。

SRC相同性領域2ドメイン含有ホスファターゼ1（SHP-1）は、リンパ球分化、増殖、および活性化の重要なメディエーターです。以前に、B細胞リンカータンパク質（BLNK）がSHP-1の生理学的基質であり、B細胞受容体（BCR）誘発性C-Jun NH（2） - 末端キナーゼ（JNK）の活性化が発現する細胞で大幅に増強されることを示しました。ホスファターゼ活性を欠くSHP-1の形態（SHP-1-C/s）。この研究では、SHP-1が脾臓B細胞のJNK活性化に負の調節効果も発揮することを確認しました。B細胞におけるSHP-1の役割をさらに明確にするために、SHP-1によるBLNKの脱リン酸化がダウンストリームシグナル伝達イベントにどのように影響するかを調べました。4つのチロシン残基を含むNH（2）末端領域を欠くBLNK変異体（BLNK Delta N）がSHP-1-C/S発現WEHI-231細胞に導入された場合、JNK活性化の増強が阻害されました。BLNKを介してJNK活性化を調節する可能性が高い候補タンパク質の中で、NCKアダプタータンパク質はチロシンリン酸化BLNKと関連することがわかっており、この関連はSHP-1-C/S発現細胞でより顕著でした。さらに、NCKの支配的陰性型の発現は、BCR誘発性JNK活性化を阻害しました。最後に、BCR誘発アポトーシスは、SHP-1-C/S発現細胞で抑制され、NCK SH2変異体の共発現またはSEK1の支配的なネガティブな型がこの表現型を逆転させました。まとめて、これらの結果は、SHP-1がBLNKに作用し、NCKとの関連を調節することを示唆しており、NCKはJNKの活性化を負に調節しますが、アポトーシスにプラスの効果を発揮します。

Src homology region 2 domain-containing phosphatase 1 (SHP-1) is a key mediator in lymphocyte differentiation, proliferation, and activation. We previously showed that B cell linker protein (BLNK) is a physiological substrate of SHP-1 and that B cell receptor (BCR)-induced activation of c-Jun NH(2)-terminal kinase (JNK) is significantly enhanced in cells expressing a form of SHP-1 lacking phosphatase activity (SHP-1-C/S). In this study, we confirmed that SHP-1 also exerts negative regulatory effects on JNK activation in splenic B cells. To further clarify the role of SHP-1 in B cells, we examined how dephosphorylation of BLNK by SHP-1 affects downstream signaling events. When a BLNK mutant (BLNK Delta N) lacking the NH(2)-terminal region, which contains four tyrosine residues, was introduced in SHP-1-C/S-expressing WEHI-231 cells, the enhanced JNK activation was inhibited. Among candidate proteins likely to regulate JNK activation through BLNK, Nck adaptor protein was found to associate with tyrosine-phosphorylated BLNK and this association was more pronounced in SHP-1-C/S-expressing cells. Furthermore, expression of dominant-negative forms of Nck inhibited BCR-induced JNK activation. Finally, BCR-induced apoptosis was suppressed in SHP-1-C/S-expressing cells and coexpression of Nck SH2 mutants or a dominant-negative form of SEK1 reversed this phenotype. Collectively, these results suggest that SHP-1 acts on BLNK, modulating its association with Nck, which in turn negatively regulates JNK activation but exerts a positive effect on apoptosis.