修飾されたRD114エンベロープ糖タンパク質で仮名型化されたレンチウイルスベクターは、血清の安定性の増加を示し、ヒトおよび非ヒト霊長類に由来する一次リンパ球およびCD34+細胞の拡張を増加させました

異なるウイルス糖タンパク質（GPS）で仮名型を使用したレンチウイルスベクターを生成すると、ベクターの物理化学的特性、宿主免疫系との相互作用、および宿主範囲が調節される可能性があります。レトロウイルスの両方のGPSの能力を調査しました（角座用マウス白血病ウイルス[MLV-A]、ギボン類人猿白血病ウイルス[GALV]; RD114、ネコ内因性ウイルス）と非レトロウイルス（Fowl Plague Virus [FPV]; Ebola Virus[ebov];静脈口内炎ウイルス[VSV];リンパ球性絨毛膜炎ウイルス[LCMV]）は、Simian免疫不全ウイルスに由来する偽型レンチウイルスベクター（SIVMAC251）に起因します。SIVベクターは、FPVヘマグルチニン、VSV-G、LCMV、およびMLV-A GPSで効率的に偽型を飼育しました。対照的に、GALVおよびRD114 GPSは、ベクターに対する感染性がはるかに低いことを授与しました。膜貫通ドメインおよび取り込み能力MLV-A GPおよびRD114およびGALV GPの細胞質尾部におけるいくつかの構造的特徴の保存を活用して、GALVまたはRD114 GPSの細胞外および輸血型ドメインをコード化するキメラGPを生成し、キトプラミックに融合しました。MLV-A GPの尾（指定tr）。重要なことに、これらのGALV/TRおよびRD114/TR GPキメラを使用して偽型を飼育したSIV由来のベクトルは、親GPSでコーティングされたベクターよりも有意に高い力価を持っていました。さらに、RD114/TR-PSEUDOTYTEDベクターは効率的に濃縮されており、ヒト血清とマカクの両方の血清の補完によって誘発される不活性化に耐性があり、修正されたRD114 GP-型型のレンチウイルスベクターがin vivo遺伝子移動の適用に特に興味深いものである可能性があることを示しています。さらに、他のレトロウイルスGPSまたはVSV-Gと仮名化されたベクターと比較して、RD114/TR-Pseudotyped Vectorは、ヒトおよびマカクの原発性血液球およびCD34+細胞の拡張形成を示しました。

Generating lentiviral vectors pseudotyped with different viral glycoproteins (GPs) may modulate the physicochemical properties of the vectors, their interaction with the host immune system, and their host range. We have investigated the capacity of a panel of GPs of both retroviral (amphotropic murine leukemia virus [MLV-A]; gibbon ape leukemia virus [GALV]; RD114, feline endogenous virus) and nonretroviral (fowl plague virus [FPV]; Ebola virus [EboV]; vesicular stomatitis virus [VSV]; lymphocytic choriomeningitis virus [LCMV]) origins to pseudotype lentiviral vectors derived from simian immunodeficiency virus (SIVmac251). SIV vectors were efficiently pseudotyped with the FPV hemagglutinin, VSV-G, LCMV, and MLV-A GPs. In contrast, the GALV and RD114 GPs conferred much lower infectivity to the vectors. Capitalizing on the conservation of some structural features in the transmembrane domains and cytoplasmic tails of the incorporation-competent MLV-A GP and in RD114 and GALV GPs, we generated chimeric GPs encoding the extracellular and transmembrane domains of GALV or RD114 GPs fused to the cytoplasmic tail (designated TR) of MLV-A GP. Importantly, SIV-derived vectors pseudotyped with these GALV/TR and RD114/TR GP chimeras had significantly higher titers than vectors coated with the parental GPs. Additionally, RD114/TR-pseudotyped vectors were efficiently concentrated and were resistant to inactivation induced by the complement of both human and macaque sera, indicating that modified RD114 GP-pseudotyped lentiviral vectors may be of particular interest for in vivo gene transfer applications. Furthermore, as compared to vectors pseudotyped with other retroviral GPs or with VSV-G, RD114/TR-pseudotyped vectors showed augmented transduction of human and macaque primary blood lymphocytes and CD34+ cells.