カルシニューリン阻害剤、シクロスポリンAおよびタクロリムスは、結腸上皮およびマクロファージ細胞株における誘導性一酸化窒素シンターゼの発現を阻害します

一酸化窒素（NO）産生が炎症性腸疾患で増加し、選択的誘導性一酸化窒素シンターゼ（INOS）阻害剤は、実験的に誘導された大腸炎において抗炎症性であることが証明されています。本研究の目的は、結腸上皮およびマクロファージ細胞株のNO産生に炎症性腸疾患効果の治療に使用される薬物が使用されるかどうかをテストすることでした。シクロスポリンA、タクロリムス（FK-506）、メトトレキサート、スルファサラジン、5-アミノサリチル酸、および2つの新規TNF-α拮抗薬エタニセプトとインフリキシマブの効果をテストしました。。シクロスポリンAおよびFK-506は、両方の細胞株で治療的に達成可能な薬物濃度で用量依存的に、INOSの発現およびその後のNO産生を阻害しました。この効果は、シクロスポリンAがエンドトキシンの1時間前に投与された場合に最も顕著であり、その後減少し、シクロスポリンAがイノス活性を阻害しないことを示しています。シクロスポリンAもFK-506も、INOSの重要な転写因子である核因子カッパブ（NF-Kappab）の活性化を変化させませんでした。スルファサラジンは、高（100マイクローム）の薬物濃度で投与された場合にのみ、NO産生をわずかに阻害しました。メトトレキサート、5-アミノサリチル酸およびTNF-alpha拮抗薬インフリキシマブおよびエタネルセプトは実質的に効果がありませんでした。ホスファターゼカルシニューリン、シクロスポリンAおよびFK-506の2つの阻害剤は、ヒトT84結腸上皮細胞およびNF-Kappab独立した方法によるマウスJ774マクロファージにおけるINOS発現とNO産生を阻害しました。これらの発見は、これらの化合物の抗炎症作用に関係しています。

Nitric oxide (NO) production is increased in inflammatory bowel disease and selective inducible nitric oxide synthase (iNOS) inhibitors have proved to be anti-inflammatory in experimentally induced colitis. The aim of the present study was to test if drugs used in the treatment of inflammatory bowel disease effect on NO production in colon epithelial and macrophage cell lines. We tested the effects of cyclosporin A, tacrolimus (FK-506), methotrexate, sulfasalazine, 5-aminosalicylic acid and two novel TNF-alpha antagonists etanercept and infliximab on endotoxin-induced NO production in human T84 colon epithelial cells and in murine J774 macrophages. Cyclosporin A and FK-506 inhibited iNOS expression, and subsequent NO production, in a dose-dependent manner at therapeutically achievable drug concentrations in both cell lines. The effect was most pronounced when cyclosporin A was given 1 h prior to 4 h after endotoxin, and declined thereafter, indicating that cyclosporin A does not inhibit iNOS activity. Neither cyclosporin A nor FK-506 altered the activation of nuclear factor-kappaB (NF-kappaB) that is a critical transcription factor for iNOS. Sulfasalazine inhibited NO production slightly only when given at high (100 microM) drug concentrations. Methotrexate, 5-aminosalicylic acid and TNF-alpha antagonists infliximab and etanercept were practically ineffective. Two inhibitors of phosphatase calcineurin, cyclosporin A and FK-506, inhibited iNOS expression and NO production in human T84 colon epithelial cells and in murine J774 macrophages by an NF-kappaB independent manner. These findings are implicated in the anti-inflammatory action of these compounds.