アルファトコフェロールは、ハカットケラチノサイトの細胞内グルタチオンレベルを増加させます

α-トコフェロールは、抗酸化活性を示す親油性ビタミンです。この研究の目的は、HACATケラチノサイトにおける細胞内グルタチオン（GSH）レベルの調節におけるα-トコフェロールの役割を明確にすることでした。HACATケラチノサイトをα-トコフェロールで24時間培養した場合、細胞内GSHは、アルファトコフェロールテストのすべての濃度で増加しました。さらに、50ミクロムでα-トコフェロールで24時間培養したHACATケラチノサイトは、H2O2に対する耐性を示しました。ただし、HACATケラチノサイトをアルファトコフェロールに1時間短時間曝露しても、GSHレベルまたはH2O2に対する耐性のいずれにも影響しませんでした。これらの発見は、α-トコフェロールによって誘導的に合成されるGSHが、外因性の酸化ストレスを効果的に低下させることを示唆しています。GSHレベルに対するアルファトコフェロールの効果を評価するために、ガンマ - グルタミルシステインシンテターゼ（ガンマ-GCS）の典型的な阻害剤であるBSOが使用されました。BSOがHACATケラチノサイトに添加されたとき、GSHレベルでのアルファトコフェロールの作用は観察されませんでした。一方、アルファトコフェロールは、ガンマ-GCS-HS（重いサブユニット）mRNAのアップレギュレーションをもたらしました。さらに、水溶性のα-トコフェロール誘導体（α-トコフェロールリン酸およびトロロックス）は、GSHレベルに変化を引き起こしませんでした。これらの結果から、α-トコフェロールは、ガンマGCS-HS mRNAのアップレギュレーションを通じてハカットケラチノサイトの細胞内GSHレベルを増加させると結論付けられました。

alpha-Tocopherol is a lipophilic vitamin that exhibits an antioxidative activity. The purpose of this study was to clarify the roles of alpha-tocopherol in the regulation of intracellular glutathione (GSH) levels in HaCaT keratinocytes. When HaCaT keratinocytes were cultivated with alpha-tocopherol for 24 h, the intracellular GSH was increased at every concentration of alpha-tocopherol tested. Furthermore, the HaCaT keratinocytes cultured with alpha-tocopherol at 50 microM for 24 h exhibited resistance against H2O2. However, a short exposure of HaCaT keratinocytes to alpha-tocopherol for 1 h did not influence either the GSH level or the resistance to H2O2. These findings suggest that GSH, which is inductively synthesized by alpha-tocopherol, effectively reduces exogenous oxidative stress. To evaluate the effect of alpha-tocopherol on the GSH level, BSO, which is a typical inhibitor of gamma-glutamylcysteine synthetase (gamma-GCS), was used. When BSO was added to HaCaT keratinocytes, no action of alpha-tocopherol on the GSH level was observed. On the other hand, alpha-tocopherol resulted in the up-regulation of gamma-GCS-HS (heavy subunit) mRNA. In addition, water soluble alpha-tocopherol derivatives (alpha-tocopherol phosphate and trolox) caused no changes in GSH level. From these results, it was concluded that alpha-tocopherol increases the intracellular GSH level of HaCaT keratinocytes through the up-regulation of gamma-GCS-HS mRNA.