改良型Davidson液による精巣と眼球の固定：Bouin液および従来のDavidson液との比較

生殖に対する化学物質の効果をテストするための規制ガイドラインの最新の改訂は、組織病理学的評価のための精巣の形態学的詳細を保存するために、ホルマリンの代わりにBouinの液体（BF）または「同等の固定剤」を推奨しています。ただし、BFのピクリック酸は、健康と安全の危険であり、実験室の廃棄物処理の問題でもあります。さらに、BFの使用は労働集約的であり、精巣抗原の最適な保存と免疫組織化学（IHC）検出のためにピクリック酸を除去するために複数のアルコール洗浄を必要とします。最近、修正されたDavidsonの液体（MDF）が、日常的な組織病理学的検査のためにテストを修正するためにBFの高等教育として報告されています。この研究は、BFおよびMDFで固定された精巣標本の全体的な組織形態学的透明度と免疫および組織化学的染色を比較しました。さらに、従来のDavidsonの固定液（DF）が目の最適な固定に日常的に使用されるため、DFとMDFによる眼組織形態の保存を比較しました。MDFは、BFと比較して、精細管の収縮が著しく少なくなり、全体的な全体的な形態の詳細が発生しました。DFとは異なり、MDFは、精子形成の病期分類が必要な場合に、周期酸シッフ（PAS）試薬を使用した先端の優れた染色もサポートしていました。アンドロゲン受容体とPCNAのIHC検出（Sertoli細胞を直接および間接的に識別するため）およびタンパク質遺伝子産物9.5（標識精子形成症）は、BF固定標本と比較してMDFで優れていました。眼の組織病理学的検査、棒と錐体の並置と保存、および網膜の核層は、DFと比較してMDFでわずかに劣っていました。このホワイトペーパーでは、MDFは、IHC染色と詳細な組織病理学的検査の両方について、BFの精巣に対する同等の、多くの点で優れた保存を提供することを実証しています。また、細胞保存の品質はDFの品質よりも劣っていますが、眼に許容できる固定液を提供します。

Most recent revisions of regulatory guidelines for testing effects of chemicals on reproduction recommend Bouin's fluid (BF) or a "comparable fixative" instead of formalin to preserve the morphologic detail of testes for histopathological evaluation. However, picric acid in BF is a health and safety hazard, as well as a laboratory waste disposal problem. Furthermore, use of BF is labor intensive, requiring multiple alcohol rinses to remove picric acid for optimum preservation and immunohistochemical (IHC) detection of testicular antigens that may potentially be used to identify and quantify cells and functional proteins with critical roles in spermatogenesis. Recently a modified Davidson's fluid (mDF) has been reported as an altemative to BF to fix testes for routine histopathological examination. This study compared the overall histomorphologic clarity and the immuno- and histochemical staining of testicular specimens fixed in BF and mDF. Additionally, because conventional Davidson's fixative (DF) is used routinely for optimum fixation of eyes, preservation of ocular histomorphology by DF and mDF was compared. mDF resulted in noticeably less shrinkage of the seminiferous tubules and superior overall morphologic detail compared to BF. Unlike DF, the mDF also supported excellent staining of acrosomes with periodic acid-Schiff (PAS) reagent when staging of spermatogenesis was required. IHC detection of androgen receptor and PCNA (to directly and indirectly identify Sertoli cells) as well as protein gene product 9.5 (to label spermatogonia) was Superior in mDF compared to BF-fixed specimens. For histopathological examination of the eye, apposition and preservation of rods and cones, and nuclear layers of the retina were slightly inferior with mDF compared to DF. This paper has demonstrated that mDF provides comparable, and in many respects superior preservation of the testes to that of BF, both for IHC staining and for detailed histopathological examination. It also provides an acceptable fixative for eyes, although the quality of cellular preservation is inferior to that of DF.