シリビニンは、ヒト前立腺癌DU145細胞をドキソルビシン誘発成長阻害、G2-M停止、およびアポトーシスと強く相乗的に相乗的にします

目的：我々は最近、培養およびヌードマウス異種移植片におけるヒト前立腺癌細胞に対して、広く消費された栄養補助食品アザミ抽出物の活発な成分であるシリビニンの強力な抗がん効果を示しました。また、動物研究における薬理学的に達成可能なシリビニンの濃度は、動物に見かけの毒性を示さなかった用量レジメンに応じて、25〜100マイクロームの範囲であることが観察されました。この研究では、シリビニンが前立腺癌に対する化学療法薬ドキソルビシンの治療可能性を相乗的に相乗するかどうかを評価しました。 実験設計：前立腺癌細胞をシリビニンとドキソルビシンで単独または組み合わせて処理し、細胞の成長を手動の細胞カウントによって決定しました。細胞周期の進行は、サポニン/ヨウ化プロピジウム染色と蛍光活性化細胞ソーター分析によって評価されました。細胞周期調節因子のタンパク質レベルは、ウエスタンブロッティングによって決定され、CDC2/P34キナーゼ活性はインビーズキナーゼアッセイによって分析されました。アポトーシスは、アネキシンV/ヨウ化プロピジウム染色および蛍光活性化細胞ソーター分析によって定量化されました。 結果：シリビニンは、前立腺癌DU145細胞（併用指数、0.235-0.587）におけるドキソルビシンの成長阻害効果を強く相乗しました。-mこの組み合わせにより、シリビニンおよびドキソルビシン治療のみの19および41％の細胞と比較して、それぞれフェーズ。G2-M停止の基礎となるメカニズムは、CDC25C、CDC2/P34、およびサイクリンB1タンパク質発現およびCDC2/P34キナーゼ活性に対する併用の強い阻害効果を示しました。さらに重要なことに、この組み合わせにより、いずれかの薬剤単独で15％と比較して、41％のアポトーシス細胞死が発生しました。シリビニンとドキソルビシンだけでなく、組み合わせても、アンドロゲン依存性前立腺癌LNCAP細胞の成長を阻害するのにも効果的でした。 結論：これらの発見は、前臨床前立腺癌モデルにおけるこの組み合わせを伴うin vivo研究の必要性を示唆しています。陽性の結果は、前立腺癌患者の臨床応用に関連する可能性があります。

PURPOSE: We recently demonstrated the strong anticancer efficacy of silibinin,an active constituent of a widely consumed dietary supplement milk thistle extract, against human prostate cancer cells in culture and nude mice xenografts. We also observed that pharmacologically achievable concentrations of silibinin in animal studies were in the range of 25-100 microM, depending on the dose regimen, which did not show any apparent toxicity to the animals. In this study, we assessed whether silibinin synergizes the therapeutic potential of the chemotherapeutic drug doxorubicin against prostate cancer, the effectiveness of which is limited because of high systemic toxicity. EXPERIMENTAL DESIGN: Prostate cancer cells were treated with silibinin and doxorubicin, either alone or in combination, and cell growth was determined by manual cell counting. Cell cycle progression was assessed by saponin/propidium iodide staining and fluorescence-activated cell sorter analysis. Protein levels of cell cycle regulators were determined by Western blotting, and cdc2/p34 kinase activity was analyzed by in-beads kinase assay. Apoptosis was quantified by annexin V/propidium iodide staining and fluorescence-activated cell sorter analysis. RESULTS: Silibinin strongly synergized the growth-inhibitory effect of doxorubicin in prostate carcinoma DU145 cells (combination index, 0.235-0.587), which was associated with a strong G(2)-M arrest in cell cycle progression, showing 88% cells in G2-M phase by this combination compared with 19 and 41% of cells in silibinin and doxorubicin treatment alone, respectively. The underlying mechanism of G2-M arrest showed a strong inhibitory effect of combination on cdc25C, cdc2/p34, and cyclin B1 protein expression and cdc2/p34 kinase activity. More importantly, this combination caused 41% apoptotic cell death compared with 15% by either agent alone. Silibinin and doxorubicin alone as well as in combination were also effective in inhibiting the growth of androgen-dependent prostate carcinoma LNCaP cells. CONCLUSION: These findings suggest a need for in vivo studies with this combination in preclinical prostate cancer models. Positive outcomes might be relevant for a clinical application in prostate cancer patients.