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The Journal of biological chemistry2003Feb14Vol.278issue(7)

デルタ12-オレートデサチュラーゼ関連酵素は、共役トランスデルタ11の形成に関連する、CIS-DELTA 13二重結合

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

共役リノレン酸は、いくつかの植物種の主要な種子油として存在します。ポイナ酸(またはトリコサン酸)は、CIS-DELTA9、Trans-DELTA11、CIS-DELTA13二重結合を含む共役リノレン酸異性体であり、炭素鎖です。ここでは、Trichosanthes kirilowi​​iとPunica granatumから分離されたcdnas、TKFAC、およびPGFACを報告します。種子特異的ナピンプロモーターの転写制御下でのシロイヌナズナ種子におけるTKFACおよびPGFACの発現は、総種子油の約10%(w/w)までのポイント酸の蓄積をもたらしました。対照的に、カリフラワーモザイクウイルス35Sプロモーターの制御下でコングガーゼが駆動された場合でも、葉の脂質には、ポニキ酸は葉の脂質には見られませんでした。培地中に外因性脂肪酸なしで成長した酵母細胞では、TKFACおよびPGFACの発現は、16:2dELTA(9CIS、12CIS)および18:2DELTA(9CIS、12CIS)生産を伴うポニック酸の蓄積をもたらしました。したがって、TKFACとPGFACは、コンジュガーゼとDelta12-オレートデサチュラーゼ活性の両方を備えた二機能酵素として定義されます。さらに、16:2delta(9cis、12cis)および18:3delta(9cis、12cis、15cis)、および18:2delta(9cis、12cis)がコンジュガーゼがトランスDelta11およびCis-delta13 double結合を形成する潜在的な基質であることを実証します。

共役リノレン酸は、いくつかの植物種の主要な種子油として存在します。ポイナ酸(またはトリコサン酸)は、CIS-DELTA9、Trans-DELTA11、CIS-DELTA13二重結合を含む共役リノレン酸異性体であり、炭素鎖です。ここでは、Trichosanthes kirilowi​​iとPunica granatumから分離されたcdnas、TKFAC、およびPGFACを報告します。種子特異的ナピンプロモーターの転写制御下でのシロイヌナズナ種子におけるTKFACおよびPGFACの発現は、総種子油の約10%(w/w)までのポイント酸の蓄積をもたらしました。対照的に、カリフラワーモザイクウイルス35Sプロモーターの制御下でコングガーゼが駆動された場合でも、葉の脂質には、ポニキ酸は葉の脂質には見られませんでした。培地中に外因性脂肪酸なしで成長した酵母細胞では、TKFACおよびPGFACの発現は、16:2dELTA(9CIS、12CIS)および18:2DELTA(9CIS、12CIS)生産を伴うポニック酸の蓄積をもたらしました。したがって、TKFACとPGFACは、コンジュガーゼとDelta12-オレートデサチュラーゼ活性の両方を備えた二機能酵素として定義されます。さらに、16:2delta(9cis、12cis)および18:3delta(9cis、12cis、15cis)、および18:2delta(9cis、12cis)がコンジュガーゼがトランスDelta11およびCis-delta13 double結合を形成する潜在的な基質であることを実証します。

Conjugated linolenic acids are present as major seed oils in several plant species. Punicic acid (or trichosanic acid) is a conjugated linolenic acid isomer containing cis-delta9, trans-delta11, cis-delta13 double bonds in the C(18) carbon chain. Here we report cDNAs, TkFac and PgFac, isolated from Trichosanthes kirilowii and Punica granatum, that encode a class of conjugases associated with the formation of trans-delta11, cis-delta13 double bonds. Expression of TkFac and PgFac in Arabidopsis seeds under transcriptional control of the seed-specific napin promoter resulted in accumulation of punicic acid up to approximately 10% (w/w) of the total seed oils. In contrast, no punicic acid was found in lipids from leaves even when the conjugases were driven under control of the cauliflower mosaic virus 35S promoter. In yeast cells grown without exogenous fatty acids in the culture medium, TkFac and PgFac expression resulted in punicic acid accumulation accompanied by 16:2delta(9cis, 12cis) and 18:2delta(9cis, 12cis) production. Thus, TkFac and PgFac are defined as bifunctional enzymes having both conjugase and delta12-oleate desaturase activity. Furthermore, we demonstrate that 16:2delta(9cis, 12cis) and 18:3delta(9cis, 12cis, 15cis) as well as 18:2delta(9cis, 12cis) are potential substrates for the conjugases to form trans-delta11 and cis-delta13 double bonds.

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