爬虫類の毒における毒腺トランスクリプトームのマスコンを解除します

爬虫類毒毒素の構造研究は、凍結乾燥毒サンプルを使用して達成できますが、これまで前駆体cDNAのクローニングは、毒腺の解剖のために標本の犠牲を必要としていました。ここでは、凍結乾燥した毒液サンプルに存在する毒タンパク質mRNAをマスクするシンプルで迅速な技術について説明します。この技術を説明するために、rt-pcrは、溶血性ヘビの毒に由来するcDNAライブラリからの毒性タンパク質転写産物の範囲を増幅しました。毒のあるトカゲ、ギラ・モンスター（ヘロデルマの容疑者）。これらには、D。polylepisのカリウムチャネル遮断薬、樹状突起K、H。sumpectumのExendin-4のメタロプロテイナーゼとD. acutusのホスホリパーゼA2が含まれます。これらの発見は、複雑な生物学的マトリックスにおけるmRNAの明らかな欠如および/または低下が必ずしも現実ではないことを意味し、絶滅の危機にedするヘルペトファウナを犠牲にすることなく、科学的および潜在的な治療目的のために毒素毒素に関する分子遺伝データの獲得を加速する方法を舗装することを意味します。

While structural studies of reptile venom toxins can be achieved using lyophilized venom samples, until now the cloning of precursor cDNAs required sacrifice of the specimen for dissection of the venom glands. Here we describe a simple and rapid technique that unmasks venom protein mRNAs present in lyophilized venom samples. To illustrate the technique we have RT-PCR-amplified a range of venom protein transcripts from cDNA libraries derived from the venoms of a hemotoxic snake, the Chinese copperhead (Deinagkistrodon acutus), a neurotoxic snake, the black mamba (Dendroaspis polylepis), and a venomous lizard, the Gila monster (Heloderma suspectum). These include a metalloproteinase and phospholipase A2 from D. acutus, a potassium channel blocker, dendrotoxin K, from D. polylepis, and exendin-4 from H. suspectum. These findings imply that the apparent absence and/or lability of mRNA in complex biological matrices is not always real and paves the way for accelerated acquisition of molecular genetic data on venom toxins for scientific and potential therapeutic purposes without sacrifice of endangered herpetofauna.