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The Plant journal : for cell and molecular biology2002Dec01Vol.32issue(5)

葉緑体トリオースリン酸トリオス/リン酸トランスロケーターのシロイヌナズナのノックアウト変異体は、澱粉合成の場合にのみひどく損なわれますが、澱粉の動員は廃止されません

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

葉緑体トリオースリン酸/リン酸トランスロケーター(TPT)に欠陥があるシロイヌナズナtpt-1変異体は、逆遺伝学によって分離されました。TPT遺伝子の開始ATGの24 bp上流のT-DNA挿入が含まれています。変異体はTPT転写産物を欠いており、リン酸トリオース(TP)特異的輸送活動は野生型の5%未満に減少します。14CO2標識研究と組み合わせたデンプン、可溶性糖、リン酸化中間体の内容物の日中変動の分析は、細胞質スクロース生合成のためのTP輸出の欠如が、連続加速澱粉代謝回転とストロマからのニュオラル糖の輸出の両方によってほぼ完全に補償されたことを示したことが示されました。一日中。光中のスクロース生合成のためのTPではなく、グルコース6-リン酸(輸出グルコースから生成された)の利用は、サイトゾルフルクトース1,6-ビスホスファターゼによって触媒される重要な調節ステップをバイパスします。ショ糖生合成の飼料依存制御における規制の役割にもかかわらず、照明時のフルクトース2,6-ビスリン酸含有量の変動は、変異体と野生型で類似していた。デンプン(sex1)を動員することができない変異体とのTPT-1の交差は、デンプン(ADG1-1)を合成することで、二重変異体の成長と光合成が澱粉生合成ではなく、その動員ではなく影響を受けた場合にのみ著しく損なわれていることが明らかになりました。TPT-1/sex1の場合、TPTの欠如と澱粉の動員の欠陥を組み合わせて、追加の代償メカニズム、すなわち、高分子量多糖の形成と(最も可能性の高い)急速な回転率が現れました。定常状態のRNAレベルとTP輸送が可能な他のリン酸トランスケーターの輸送活性は、変異体では影響を受けませんでした。

葉緑体トリオースリン酸/リン酸トランスロケーター(TPT)に欠陥があるシロイヌナズナtpt-1変異体は、逆遺伝学によって分離されました。TPT遺伝子の開始ATGの24 bp上流のT-DNA挿入が含まれています。変異体はTPT転写産物を欠いており、リン酸トリオース(TP)特異的輸送活動は野生型の5%未満に減少します。14CO2標識研究と組み合わせたデンプン、可溶性糖、リン酸化中間体の内容物の日中変動の分析は、細胞質スクロース生合成のためのTP輸出の欠如が、連続加速澱粉代謝回転とストロマからのニュオラル糖の輸出の両方によってほぼ完全に補償されたことを示したことが示されました。一日中。光中のスクロース生合成のためのTPではなく、グルコース6-リン酸(輸出グルコースから生成された)の利用は、サイトゾルフルクトース1,6-ビスホスファターゼによって触媒される重要な調節ステップをバイパスします。ショ糖生合成の飼料依存制御における規制の役割にもかかわらず、照明時のフルクトース2,6-ビスリン酸含有量の変動は、変異体と野生型で類似していた。デンプン(sex1)を動員することができない変異体とのTPT-1の交差は、デンプン(ADG1-1)を合成することで、二重変異体の成長と光合成が澱粉生合成ではなく、その動員ではなく影響を受けた場合にのみ著しく損なわれていることが明らかになりました。TPT-1/sex1の場合、TPTの欠如と澱粉の動員の欠陥を組み合わせて、追加の代償メカニズム、すなわち、高分子量多糖の形成と(最も可能性の高い)急速な回転率が現れました。定常状態のRNAレベルとTP輸送が可能な他のリン酸トランスケーターの輸送活性は、変異体では影響を受けませんでした。

The Arabidopsis thaliana tpt-1 mutant which is defective in the chloroplast triose phosphate/phosphate translocator (TPT) was isolated by reverse genetics. It contains a T-DNA insertion 24 bp upstream of the start ATG of the TPT gene. The mutant lacks TPT transcripts and triose phosphate (TP)-specific transport activities are reduced to below 5% of the wild type. Analyses of diurnal variations in the contents of starch, soluble sugars and phosphorylated intermediates combined with 14CO2 labelling studies showed, that the lack of TP export for cytosolic sucrose biosynthesis was almost fully compensated by both continuous accelerated starch turnover and export of neutral sugars from the stroma throughout the day. The utilisation of glucose 6-phosphate (generated from exported glucose) rather than TP for sucrose biosynthesis in the light bypasses the key regulatory step catalysed by cytosolic fructose 1,6-bisphosphatase. Despite its regulatory role in the feed-forward control of sucrose biosynthesis, variations in the fructose 2,6-bisphosphate content upon illumination were similar in the mutant and the wild type. Crosses of tpt-1 with mutants unable to mobilise starch (sex1) or to synthesise starch (adg1-1) revealed that growth and photosynthesis of the double mutants was severely impaired only when starch biosynthesis, but not its mobilisation, was affected. For tpt-1/sex1 combining a lack in the TPT with a deficiency in starch mobilisation, an additional compensatory mechanism emerged, i.e. the formation and (most likely) fast turnover of high molecular weight polysaccharides. Steady-state RNA levels and transport activities of other phosphate translocators capable of transporting TP remained unaffected in the mutants.

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