K（ATP）チャネルのKIR62サブユニットのサイトゾルドメインの相互作用は、スルホニル尿素によって変調されます

ATPに敏感なカリウム（K（ATP））チャネルの孔形成サブユニットのNH（2）およびCOOH末端KIR6.2は、両方とも細胞内に横たわって相互作用します。この相互作用を研究するために、シアン蛍光タンパク質（CFP）と黄色の蛍光タンパク質（YFP）を、それぞれKIR6.2のNH（2）とCOOH末端（CFP-Kir6.2-YFP）に融合しました。これらの蛍光タンパク質は、距離依存性蛍光共鳴エネルギー移動（FRET）を可能にするのに十分なスペクトルオーバーラップを持っています。CFP-KIR6.2-YFPがヒト胚性腎細胞で発現し、440 nmで照らされてCFPを励起すると、YFP発光スペクトルのピークである535 nmで有意な蛍光を記録しました。これは、FRETが発生していることを示しており、したがって、Kir6.2のNH（2）とCOOH末端が互いに近接していることを示しています。排出比F（535）/F（480）は、sur2aの共発現によって増加しましたが、Sur1ではなくSur2aではなくSur1がKir6.2 Nh（2）とCOOH末端相互作用に影響することを示唆しています。この相互作用は、トルブタミドスルホニル尿素とグリクラジドによって減少しましたが、細孔遮断薬バリウムによっては減少しました。トルブタミド応答の特性は、薬物がKir6.2の低親和性部位に結合することにより、Kir6.2のNH（2）とCOOH末端の間の相互作用を破壊することを示しています。

The NH(2)- and COOH-termini of the ATP-sensitive potassium (K(ATP)) channel pore-forming subunit, Kir6.2, both lie intracellularly and interact with one another. To study this interaction, cyan fluorescent protein (CFP) and yellow fluorescent protein (YFP) were fused to the NH(2)- and COOH-termini of Kir6.2, respectively (CFP-Kir6.2-YFP). These fluorescent proteins have sufficient spectral overlap to allow distance-dependent fluorescence resonance energy transfer (FRET). When CFP-Kir6.2-YFP was expressed in human embryonic kidney cells and illuminated at 440 nm to excite CFP, significant fluorescence was recorded at 535 nm, the peak of the YFP emission spectrum. This indicated that FRET was occurring and thus that the NH(2)- and COOH-termini of Kir6.2 lie in close proximity to one another. The emission ratio, F(535)/F(480), was increased by co-expression of SUR2A, but not SUR1, suggesting that SUR2A but not SUR1 influences the Kir6.2 NH(2)- and COOH-terminal interaction. This interaction was reduced by the sulfonylureas tolbutamide and gliclazide, but not by the pore blocker barium. The properties of the tolbutamide response indicate that the drug disrupts the interaction between the NH(2)- and COOH-termini of Kir6.2 by binding to a low-affinity site on Kir6.2.