ヒトT細胞のビスペルオキソバナジウムホスホチロシルホスファターゼ阻害剤を治療すると、シクロオキシゲナーゼ-2遺伝子の活性化につながります

タンパク質 - チロシンホスファターゼ（PTP）阻害剤は、Tリンパ球の強力な活性化因子であり、おそらくT細胞受容体（TCR）シグナル伝達の初期段階に影響を与える可能性が高い。TCRトリガー後に誘導されるヒトシクロオキシゲナーゼ2（COX-2）遺伝子の発現に対するPTP阻害剤ビスペルオキソバナジウム（BPV）の効果を分析しました。ここでは、COX-2プロモーター活性がBPV（PIC）へのJurkat T細胞の暴露後に著しく上方制御されていることを示します。興味深いことに、BPVと組み合わせて、フォルスコリンなどの周期的なAMPエレベート剤によるジュルカット細胞の治療により、より重要なCOX-2転写活性化が生じました。このような活性化は、免疫抑制薬FK506およびシクロスポリンAによって阻害されます。COX-2プロモーター領域内にある活性化T細胞（NFAT）結合部位の2つの核因子は、COX-2プロモーターに対するBPVを介した陽性効果に関与しています。エレクトロバリティシフトアッセイにより、NFAT1と活性化因子タンパク質-1がBPV処理後の核に移行することが示されました。COX-2転写活性化につながるBPV依存性シグナル伝達カスケードにおけるP56（LCK）、ZAP-70、P36（LAT）、およびカルシウムの積極的な関与が、不足細胞株および特定の阻害剤を使用して実証されました。いくつかのPTPはBPVの標的となる可能性が最も高いが、我々のデータは、BPVを介したシグナル伝達カスケードがSHP-1の阻害によって開始されることを示唆している。タンパク質-1核転座。これらの結果は、PTP阻害剤がTCRトリガーによって誘導される刺激と非常によく似た方法でCOX-2遺伝子発現を活性化できることを示唆しています。

Protein-tyrosine phosphatase (PTP) inhibitors are potent activators of T lymphocytes, most likely by affecting the early steps of T cell receptor (TCR) signaling. We have analyzed the effect of the PTP inhibitor bisperoxovanadium (bpV) on expression of the human cyclooxygenase 2 (COX-2) gene, which is induced following TCR triggering. Here we show that COX-2 promoter activity is markedly up-regulated following exposure of Jurkat T cells to bpV(pic). Interestingly enough, treatment of Jurkat cells with cyclic AMP-elevating agents such as forskolin, in combination with bpV, resulted in a more important COX-2 transcriptional activation. Such activation is inhibited by the immunosuppressive drugs FK506 and cyclosporin A. The two nuclear factor of activated T cells (NFAT) binding sites located within the COX-2 promoter region are involved in bpV-mediated positive effect on COX-2 promoter. Electromobility shift assays showed that NFAT1 and activator protein-1 are both translocated to the nucleus following bpV treatment. The active participation of p56(lck), ZAP-70, p36(LAT), and calcium in the bpV-dependent signaling cascade leading to COX-2 transcriptional activation was demonstrated using deficient cell lines and specific inhibitors. Although several PTPs are most likely targeted by bpV, our data suggest that the bpV-mediated signaling cascade is initiated by inhibition of SHP-1, which leads to phosphorylation of p56(lck) and ZAP-70 and, ultimately, to NFAT and activator protein-1 nuclear translocation. These results suggest that PTP inhibitors can activate COX-2 gene expression in a manner very similar to the stimulation induced by TCR triggering.