有糸分裂クローン拡大：脂肪生成に必要な同期プロセス

分化するように誘導されると、成長が逮捕された3T3-L1前脂肪細胞は、細胞周期に同期して再入力し、有糸分裂クローン拡大（MCE）を経験し、その後脂肪細胞の表現型を産生する遺伝子の発現が続きます。Preadipocytesは、CDK2-シクリン-EAの発現活性化、p27KIP1の代謝回転、RBの過剰リン酸化、核から細胞質へのサイクリンD（1）の転座、および細胞質へのGSK-3BETEから核へのgSK-3BETEによって示されるように、G（1）Sチェックポイントを同期して横断します。、および[（3）h]チミジンのDNAへの取り込み。細胞がG（1）Sチェックポイントを通過すると、CeBPbetaはDNA結合活性を獲得し、脂肪細胞タンパク質の発現で頂点に達する転写活性化のカスケードを開始します。マイトジェン活性化タンパク質キナシXtracellularシグナル調節キナーゼキナーゼ（MEK）阻害剤PD98059の遅延は、細胞サイクルマーカー、MCE、および脂肪生成の発現に匹敵する遅延を引き起こす遅延を引き起こす遅延の程度をブロック、MCE、および分化しません。より強力で特異的なMEK阻害剤UO126およびサイクリン依存性キナーゼ阻害剤ロスコビチンは、異なる点、ブロックMCE、細胞周期の発現、脂肪細胞マーカー、および脂肪生成を阻害します。これらの結果は、MCEが脂肪細胞に3T3-L1前脂肪細胞の分化の前提条件であることを示しています。

When induced to differentiate, growth-arrested 3T3-L1 preadipocytes synchronously reenter the cell cycle and undergo mitotic clonal expansion (MCE) followed by expression of genes that produce the adipocyte phenotype. The preadipocytes traverse the G(1)S checkpoint synchronously as evidenced by the expressionactivation of cdk2-cyclin-EA, turnover of p27kip1, hyperphosphorylation of Rb, translocation of cyclin D(1) from nuclei to cytoplasm and GSK-3beta from cytoplasm to nuclei, and incorporation of [(3)H]thymidine into DNA. As the cells cross the G(1)S checkpoint, CEBPbeta acquires DNA-binding activity, initiating a cascade of transcriptional activation that culminates in the expression of adipocyte proteins. The mitogen-activated protein kinaseextracellular signal-regulated kinase kinase (MEK) inhibitor PD98059 delays, but does not block, MCE and differentiation, the extent of the delay causing a comparable delay in the expression of cell-cycle markers, MCE, and adipogenesis. The more potent and specific MEK inhibitor UO126 and the cyclin-dependent kinase inhibitor roscovitine, which inhibit the cell cycle at different points, block MCE, expression of cell cycle and adipocyte markers, as well as adipogenesis. These results show that MCE is a prerequisite for differentiation of 3T3-L1 preadipocytes into adipocytes.