ヘマトキシリンとエオシンで染色された膵腺房細胞のZymogen顆粒の選択的蛍光

ヘマトキシリンとエオシンYで染色した後、マウス膵臓のパラフィン切片を透過光、上蛍光、および共焦点レーザー走査顕微鏡で調べました。光学顕微鏡では、膵腺房細胞の核が基底に位置していることが明らかになりましたが、細胞の頂点は好酸球性に見えましたが、分泌顆粒は視覚化するのが困難でした。バイオレットブルーの光励起下で、腺房細胞の頂点にあるZymogen顆粒は、強い黄色がかった蛍光を示しました。細胞質の他の部分はかすかに蛍光のみであり、核と支持組織は非蛍光でした。共焦点レーザースキャン顕微鏡では、Zymogen顆粒と細胞内の分布の鮮明な写真が生じました。ヘマトキシリンは蛍光性ではなく、Zymogen顆粒は自家蛍光ではないため、Zymogen顆粒の蛍光放出は確かにエオシンy染色の結果でした。しかし、エオシンYだけで染色しても、Zymogen顆粒または他の細胞構造の透明な蛍光画像はありませんでした。私たちの観察結果は、eosin yの蛍光発光が膵臓細胞のZymogen顆粒の容易で正確な認識を可能にすることを示しています。

Following staining with hematoxylin and eosin Y, paraffin sections of mouse pancreas were examined by transmitted light, epifluorescence and confocal laser scanning microscopy. Light microscopy revealed that the nuclei of pancreatic acinar cells were located basally, while the apices of the cells appeared eosinophilic, although the secretory granules were difficult to visualize. Under violet-blue light excitation, the zymogen granules at the apices of the acinar cells showed strong yellowish fluorescence; the other part of the cytoplasm was only faintly fluorescent and the nuclei and the supporting tissues were nonfluorescent. Confocal laser scanning microscopy resulted in clear pictures of the zymogen granules and their distribution within the cell. The fluorescent emission of zymogen granules was certainly the result of eosin Y staining, because hematoxylin is not a fluorochrome and the zymogen granules are not autofluorescent. Staining with eosin Y alone, however, did not result in clear fluorescent images of zymogen granules or any other cellular structures. Our observation shows that the fluorescence emission of eosin Y allows easy and precise recognition of zymogen granules of pancreatic cells.