生の2647マウスマクロファージでの酪酸による非筋肉ミオシン重鎖II-Cの誘導

RAW 264.7マクロファージは、非筋肉のミオシン重鎖アイソフォームとして、非筋肉ミオシン重鎖II-BおよびII-Cの発現が低いか存在しない唯一の重要な非筋肉ミオシン重鎖アイソフォームとして、非筋肉ミオシン重鎖II-Aを発現します。ヒストン脱アセチラーゼの阻害剤であるブチレートナトリウムによる細胞の治療は、非筋肉ミオシン重鎖II-Cの用量依存性誘導をもたらしました。ヒストン脱アセチラーゼの別の阻害剤であるトリコスタチンAは、非筋肉ミオシン重鎖II-Cを誘導しました。これらのヒストン脱アセチラーゼ阻害剤に応答した非筋肉ミオシン重鎖II-Cの誘導は、GCリッチDNA配列へのSP1結合の阻害剤であるミトラマイシンによって減衰しました。細菌のリポ多糖だけは、基底筋肉のミオシン重鎖II-C発現に影響を与えませんでしたが、非筋肉ミオシン重鎖II-Cの酪酸媒介誘導誘導を減衰させました。リポ多糖の効果は、ニトリック酸化物ドナーナトリウムナトリウムとノンオーエートのスペルミンによって模倣され、リポポリサッカ糖を介した非マスクルミオシン重鎖II-C誘導のダウンレギュレーションにおける一酸化窒素の役割を示唆しています。これは、誘導性一酸化酸化酸化酵素阻害剤1400Wを使用した実験によってサポートされており、非筋肉ミオシン重鎖誘導のリポ多糖を介した減衰を部分的にブロックしました。8-BROMO-CGMPは、非筋肉のミオシン媒介性鎖II-C誘導の一酸化窒素媒介阻害のCGMP非依存性メカニズムと一致して、非筋肉ミオシン重鎖誘導に影響を与えませんでした。

RAW 264.7 macrophages express nonmuscle myosin heavy chain II-A as the only significant nonmuscle myosin heavy chain isoform, with expression of nonmuscle myosin heavy chain II-B and II-C low or absent. Treatment of the cells with sodium butyrate, an inhibitor of histone deacetylase, led to the dose-dependent induction of nonmuscle myosin heavy chain II-C. Trichostatin A, another inhibitor of histone deacetylase, also induced nonmuscle myosin heavy chain II-C. Induction of nonmuscle myosin heavy chain II-C in response to these histone deacetylase inhibitors was attenuated by mithramycin, an inhibitor of Sp1 binding to GC-rich DNA sequences. Bacterial lipopolysaccharide alone had no effect on basal nonmuscle myosin heavy chain II-C expression, but attenuated butyrate-mediated induction of nonmuscle myosin heavy chain II-C. The effects of lipopolysaccharide were mimicked by the nitric oxide donors sodium nitroprusside and spermine NONOate, suggesting a role for nitric oxide in the lipopolysaccharide-mediated down-regulation of nonmuscle myosin heavy chain II-C induction. This was supported by experiments with the inducible nitric-oxide synthase inhibitor 1400W, which partially blocked the lipopolysaccharide-mediated attenuation of nonmuscle myosin heavy chain induction. 8-Bromo-cGMP had no effect on nonmuscle myosin heavy chain induction, consistent with a cGMP-independent mechanism for nitric oxide-mediated inhibition of nonmuscle myosin heavy chain II-C induction.