活性化発がん物質によるタンパク質修飾II N-アセトキシ-3-フルオレニルアセトアミドによるリボヌクレアーゼのアセチル化

ラットの強力な発がんであるN- [3H]アセトキシ-3-フルオレニルアセトアミド（N- [3H]アセトキシ-3-FAA）の反応は、バイオゲーリング上のイオン交換クロマトグラフィーによりRNAASEから分離可能な3つの修飾タンパク質を生成しました。ナトリウムイオン濃度の増加の勾配を伴うCM-30。わずかな量のRNAASEのみが回収されました。修飾されたタンパク質は、3時間でさまざまな程度まで標識され、溶出の順序は標識の範囲に反比例しました。タンパク質の修飾は、n- [3H]アセトキシ-3-FAAからRNAASEへのアセチル基の移動の結果でした。この結論の証拠は、（a）酸加水分解時の2つの主要なタンパク質からの[3H]酢酸としての放射能の84-86％の放出と、（b）eplision-N- [3H]アセチル-Lの分離でした。- これらのタンパク質の酵素加水分解物からのリジン。現在のデータと、異性体発がん物質であるn-アセトキシ-2-FAAによるRNAASEのアセチルトンについて以前に報告されたデータと比較すると、N-アセトキシ-3-FAAがより強力なアセチル格付け剤であることが示されました。現在の研究は、以前の結果と併せて、アシル化による細胞核形成の構造変化が、N-アセトキシ-3-FAAおよび関連する活性化発がん物質の生物活性の根底にある生化学的メカニズムである可能性があることを示唆しています。

The reaction of N-[3H]acetoxy-3-fluorenylacetamide (N-[3H]acetoxy-3-FAA), a potent carcinogen for the rat, with RNAase yielded three modified proteins separable from RNAase by ion exchange chromatography on Bio-Gel CM-30 with a gradient of increasing sodium ion concentration. Only minor amounts of RNAase were recovered. The modified proteins were labeled with 3H to a varying degree, and their order of elution was inversely related to the extent of labeling. The modification of the proteins was the result of the transfer of the acetyl group from N-[3H]acetoxy-3-FAA to RNAase. The evidence for this conclusion was (a) the release of 84-86% of the radioactivity as [3H] acetic acid from the two major proteins upon acid hydrolysis and (b) the isolation of eplision-N-[3H] acetyl-L-lysine from enzymatic hydrolysates of these proteins. A comparison of the present data with those previously reported for the acetylaton of RNAase by the isomeric carcinogen, N-acetoxy-2-FAA, showed that N-acetoxy-3-FAA is the more potent acetyl-lating agent. The present study in conjunction with the previous results, suggests that structural alteration of cellular nucleopholes by acylation may be a biochemical mechanism underlying the biological activity of N-acetoxy-3-FAA and related activated carcinogens.