MUS Spicilegusにおける新規Syncytium誘導および宿主範囲モロニーマウス白血病ウイルスの生成

Mus Spicilegusは、以前に異常な感染性生理マウス白血病ウイルス（MLV）および新規MLVサブグループのプロビル性エンベロープ遺伝子を抱いていることが報告されている東ヨーロッパの野生マウス種です。本研究では、M。spicilegus新生児にMoloney Ecotropic MLV（MOMLV）を接種しました。17個の接種マウスはすべて、8〜14週間後に感染性の生殖性ウイルスを生成し、2つの異常な表現型が分離株をMOMLVと区別しました。第一に、M。spicilegus分離株のほとんどは、M。dunniおよびSC-1細胞の力価に等しく成長しましたが、MOMLVはM. dunni細胞に効率的に感染しません。代表的なクローンの推定されたアミノ酸配列は、suenvのVRA内に2つのセリン残基を挿入することによりMomlvとは異なりました。これらのセリンの添加によるMOMLVの分子クローンの修飾により、M。dunni細胞の高力価に成長するウイルスが生成され、宿主範囲のこれら2つのセリン残基の役割が確立されました。2番目の異常な表現型は、M。spicilegus分離株の1つであるSPL574のみで見つかりました。SPL574は、M。dunni細胞に多核微分巨大細胞の大きなシンシチアを生成しますが、その複製は他のマウス細胞株で制限されています。シーケンスと突然変異誘発は、シンシチウム形成がVRA、S82F内の単一のアミノ酸置換に起因する可能性があることを実証しました。したがって、成長特性の変化を伴うウイルスは、M。spicilegusの成長中に選択されます。宿主範囲とシンシチウム誘導バリアントに関連する変異は、細胞表面受容体との相互作用を管理することが知られているVRAの重要な領域にマッピングされ、関連する表現型は、Mが運ぶ異常な生態腫MCAT1受容体との相互作用の変化に起因する可能性があることを示唆しています。ダニー。

Mus spicilegus is an Eastern European wild mouse species that has previously been reported to harbor an unusual infectious ecotropic murine leukemia virus (MLV) and proviral envelope genes of a novel MLV subgroup. In the present study, M. spicilegus neonates were inoculated with Moloney ecotropic MLV (MoMLV). All 17 inoculated mice produced infectious ecotropic virus after 8 to 14 weeks, and two unusual phenotypes distinguished the isolates from MoMLV. First, most of the M. spicilegus isolates grew to equal titers on M. dunni and SC-1 cells, although MoMLV does not efficiently infect M. dunni cells. The deduced amino acid sequence of a representative clone differed from MoMLV by insertion of two serine residues within the VRA of SUenv. Modification of a molecular clone of MoMLV by the addition of these serines produced a virus that grows to high titer in M. dunni cells, establishing a role for these two serine residues in host range. A second unusual phenotype was found in only one of the M. spicilegus isolates, Spl574. Spl574 produces large syncytia of multinucleated giant cells in M. dunni cells, but its replication is restricted in other mouse cell lines. Sequencing and mutagenesis demonstrated that syncytium formation could be attributed to a single amino acid substitution within VRA, S82F. Thus, viruses with altered growth properties are selected during growth in M. spicilegus. The mutations associated with the host range and syncytium-inducing variants map to a key region of VRA known to govern interactions with the cell surface receptor, suggesting that the associated phenotypes may result from altered interactions with the unusual ecotropic virus mCAT1 receptor carried by M. dunni.