タウロリジンによるFASリガンド媒介プログラム細胞死の強化

背景：タウロリジンは最近、脳腫瘍細胞に直接的かつ選択的な抗腫瘍効果をもたらすことがわかった。異なる悪性神経膠腫細胞株におけるFAS媒介アポトーシスの増強により、タウロリジンが抗腫瘍作用を発揮する能力を調査しました。 材料と方法：ヒト由来のU373細胞を培養し、タウロリジンとともにインキュベートし、阻害濃度の中央値（IC50）を計算しました。DNA含有量の変化を評価するために、フローサイトメトリック分析が実行されました。細胞は、光学顕微鏡と電子顕微鏡を使用して定性的かつ定量的に検査されました。LN-18およびLN-229細胞は、FASリガンド、タウロリジン、またはそれぞれの組み合わせのいずれかの非存在下または存在下でインキュベートされました。細胞生存率は、二重濃縮WST-1試薬を追加することにより決定されました。ミトコンドリアのコハク酸レダクターゼの活性は、ELISAリーダーで測定されました。 結果：U373細胞をタウロリジンに曝露すると、細胞生存率の濃度依存性（IC50 35.8 +/- 2.2マイクログラム/mL）が失われました。フローサイトメトリー分析により、サブゴー/G1領域におけるDNAデブリの濃度依存性の外観が示されました。6.25 vol。％FASリガンドの存在下では、LN-18細胞は細胞生存率の90％以上の損失を示しましたが、LN-229細胞の生存率はFASリガンドの高濃度でのみ減少しました。タウロリジン自体は、調査した濃度範囲におけるLN-18細胞の生存率にそれほど影響を与えませんでしたが、LN-18細胞に対するFasligandの効果を高めることができました。LN-229細胞をタウロリジンのみに曝露すると、テストされた最高濃度で約70％の細胞生存率が失われました。FASリガンドによる細胞破壊（10 vol。％）は、タウロリジンの存在下で増強されました。 結論：タウロリジンの抗腫瘍活性は、FASリガンド誘発アポトーシスの増強に部分的に基づいているようです。さらに、タウロリジンは、FASリガンドとは無関係に抗生成効果があることが実証されました。おそらく、タウロリジンは、さまざまなメカニズムに基づいて抗腫瘍活性を発揮します。

BACKGROUND: Taurolidine was recently found to have a direct and selective antineoplastic effect on brain tumor cells. The ability of taurolidine to exert antineoplastic action by enhancement of Fas-mediated apoptosis in different malignant glioma cell lines was investigated. MATERIALS AND METHODS: Human derived U373 cells were cultured and incubated with taurolidine and the median inhibitory concentration (IC50) was calculated. Flow cytometric analysis was performed to assess changes in DNA content. The cells were qualitatively and quantitatively examined using light microscopy and electron microscopy. LN-18 and LN-229 cells were incubated in the absence or presence of either Fas-ligand, taurolidine or respective combinations thereof. The cell viability was determined by adding a double concentrated WST-1 reagent. The activity of the mitochondrial succinate reductase was measured in an ELISA reader. RESULTS: The exposure of U373 cells to taurolidine led to a concentration-dependent (IC50 35.8 +/- 2.2 micrograms/ml) loss of cell viability. Flow cytometric analysis demonstrated a concentration-dependent appearance of DNA debris in the sub-Go/G1 region. In the presence of 6.25 vol.% Fas-ligand, LN-18 cells displayed more than 90% loss of cell viability, whereas the viability of LN-229 cells was reduced only at higher concentrations of Fas-ligand. Taurolidine by itself did not appreciably affect the viability of LN-18 cells in the investigated concentration range, but was able to enhance the effect of Fasligand on LN-18 cells. The exposure of LN-229 cells to taurolidine alone caused an appreciable loss of cell viability by about 70% at the highest concentration tested. Cell destruction by Fas-ligand (10 vol.%) was enhanced in the presence of taurolidine. CONCLUSION: The antineoplastic activity of taurolidine seems to be partially based on the enhancement of Fas-ligand-induced apoptosis. In addition, taurolidine was demonstrated to have an antieoplastic effect independent of Fas-ligand. Perhaps taurolidine exerts antineoplastic activity based on different mechanisms.