HUH7肝腫細胞のセレン酸誘発生存は、焦点接着キナーゼ - ホスファチジルイノシトール3-キナーゼ-Akt経路とRac1の活性化を伴います。

セレンは、血清を含まない条件下で選択されたヒト肝細胞癌細胞株の成長を維持することが示されていますが、詳細なメカニズムは未定のままでした。本研究では、生存剤としてのセレン酸ナトリウム（Na2SO3、SE）を含む分子メカニズムが決定されました。セレナイトは、HuH7細胞を血清剥離誘発性アポトーシスから保護するだけでなく、セレナイトナトリウム（10（-7）M）を補充した血清を含まない培地の長期成長もサポートします。抗アポトーシス効果は、焦点接着キナーゼおよびホスファチジルイノシトール3-キナーゼ（PI3K）-AKTキナーゼ経路の活性化と相関しています。構成的に活性なAktキナーゼおよびPI3K阻害剤LY294002を安定してトランスフェクトしたHuH7細胞を使用して、セレン酸誘発細胞生存はPI3K-AKT依存性であることが示されました。並列変化には、細胞内反応性酸素種の含有量の大幅な減少、DNA断片化の逆転、カスパーゼおよびアポトーシスシグナル調節キナーゼ1活性の抑制が含まれます。RAC1変異体N17（RAC1N17-HUH7）を安定に発現するHuH7細胞は、セレナイト治療に耐抵抗性です。これらの細胞では、セレナイトサプリメントは、Akt活性化を引き起こすことも、細胞増殖をサポートしません。このイベントでのRAC1の活性化の参加は、セレナイト治療がRAC1の活性化を大幅に強化したという事実によってサポートされています。ただし、セレナイト処理、RAC1の活性化、および焦点接着キナーゼ-PI 3-キナーゼの活性化との正確なリンクは、まだ特徴付けられていない。セレナイトによって媒介されるマイトジェン性シグナル伝達は、より高いグルタチオンペルオキシダーゼ1活性やセレノプロテインPのより高い転写レベルを含む型破りな成長刺激を伴う可能性があります。詳細に研究される肝細胞。

Selenium has been shown to sustain the growth of selected human hepatocellular carcinoma cell lines under serum-free conditions, but the detailed mechanism remained undetermined. In the present study, the molecular mechanism(s) involving sodium selenite (Na2SO3, Se) as a survival agent were determined. Selenite not only protects HuH7 cells from serum deprivation-induced apoptosis, it also supports its long-term growth in sodium selenite (10(-7)m) supplemented serum-free medium. The anti-apoptotic effect correlates with activation of focal adhesion kinase and the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)-Akt kinase pathway. Using HuH7 cells stably transfected with a constitutively active Akt kinase and PI3K inhibitor LY294002, selenite-induced cell survival was shown to be PI3K-Akt-dependent. Parallel changes included a significant reduction in the intracellular reactive oxygen species content, the reversal of DNA fragmentation, and the suppression of caspase and apoptosis signal-regulating kinase 1 activities. HuH7 cells stably expressing a Rac1 mutant N17 (Rac1N17-HuH7) are refractory to selenite treatment. In these cells selenite supplement neither triggers Akt activation nor supports cell proliferation. Participation of Rac1 activation in this event is supported by the fact that selenite treatment drastically enhanced activation of Rac1. The exact link between selenite treatment, Rac1 activation, and activation of the focal adhesion kinase-PI 3-kinase, however, remains to be characterized. The mitogenic signaling mediated by selenite may involve unconventional growth stimuli including higher glutathione peroxidase 1 activity and higher transcription levels of selenoprotein P. The selenium-HuH7 system we have established thus provides a unique tool that will allow the biological role of selenite in growth regulation of hepatocytes to be studied in detail.