ミクロソームインキュベーションにおけるクマリン代謝産物の分析へのpHを介したサンプル積み重ねによる毛細血管電気泳動の適用

pHを介したサンプルスタッキングを組み込んだ毛細血管電気泳動（CE）によるクマリンの代謝物の分析のための敏感な方法が開発されました。分析物は、ミクロソームインキュベーションのマトリックスであるリン酸緩衝液（pH 7.5; 25 mm）で検出されました。検出は、直接UV吸光度によるものでした。研究された3つの代謝物は、7-ヒドロキシクマリン（7-OHC）、4-ヒドロキシクマリン（4-OHC）および2-ヒドロキシフェニル酢酸（HPAA）、およびそれぞれ0.1、0.5および0.3マイクロームでした。次に、開発された方法をクマリンのミクロソームインキュベーションに適用しました。雄のカイノロガスモンキーミクロソームを研究で使用し、7-OHCがインキュベーション混合物で検出されました。

A sensitive method for the analysis of metabolites of coumarin by capillary electrophoresis (CE), incorporating pH-mediated sample stacking, was developed. The analytes were detected in phosphate buffer (pH 7.5; 25 mM), the matrix of the microsomal incubations. Detection was by direct UV absorbance. The three metabolites studied were 7-hydroxycoumarin (7-OHC), 4-hydroxycoumarin (4-OHC) and 2-hydroxyphenylacetic acid (HPAA), and the limits of detection of the analytes were 0.1, 0.5 and 0.3 microM, respectively. The developed method was then applied to microsomal incubations of coumarin. Male Cynomologus monkey microsomes were used in the study and 7-OHC was detected in the incubation mixture.