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目的：さまざまな芳香族誘導因子と生理学的パラメーターに応じて、Pleurotus sajor-cajuにおけるラッカーゼ等亜鉛遺伝子転写の調節を決定する。 方法と結果：4つの異なるラッカーゼアイソザイムのそれぞれのプロモーター領域は、AMPLIFIDED FLANKING領域-PCR（AFR-PCR）を使用して、P。sajor-cajuからクローン化されました。LAC1、LAC2、LAC3、およびLAC4の予測開始コドンからそれぞれ724、214、840、840、1740 bp上流に伸びるシーケンスは、それぞれそれぞれの場合にクローン化され、推定転写応答要素の存在を分析しました。金属応答要素、生体異物応答要素、抗酸化反応要素を含む多くの推定応答要素が存在するようです。さらに、異なる真菌の窒素および炭素調節に関与するAP1、AP2、CREA、およびNIT2転写因子の結合のような推定コンセンサス配列も、いくつかのアイソザイムのプロモーター領域に存在します。 結論：これらの要素は、P。sajor-cajuのラッカーゼ遺伝子発現の転写調節に関与している可能性があります。 研究の重要性と影響：異なるアイソザイム遺伝子のプロモーター領域に多くの推定転写応答要素が存在することは、P。sajor-cajuのラッカーゼ遺伝子転写の調節におけるこれらの部位の潜在的な役割を示しています。さらに、この研究は、既知のシーケンスから上流に位置する真菌DNA配列をクローンする手法としてのAFR-PCRの潜在的な有用性を示しています。
目的：さまざまな芳香族誘導因子と生理学的パラメーターに応じて、Pleurotus sajor-cajuにおけるラッカーゼ等亜鉛遺伝子転写の調節を決定する。 方法と結果：4つの異なるラッカーゼアイソザイムのそれぞれのプロモーター領域は、AMPLIFIDED FLANKING領域-PCR（AFR-PCR）を使用して、P。sajor-cajuからクローン化されました。LAC1、LAC2、LAC3、およびLAC4の予測開始コドンからそれぞれ724、214、840、840、1740 bp上流に伸びるシーケンスは、それぞれそれぞれの場合にクローン化され、推定転写応答要素の存在を分析しました。金属応答要素、生体異物応答要素、抗酸化反応要素を含む多くの推定応答要素が存在するようです。さらに、異なる真菌の窒素および炭素調節に関与するAP1、AP2、CREA、およびNIT2転写因子の結合のような推定コンセンサス配列も、いくつかのアイソザイムのプロモーター領域に存在します。 結論：これらの要素は、P。sajor-cajuのラッカーゼ遺伝子発現の転写調節に関与している可能性があります。 研究の重要性と影響：異なるアイソザイム遺伝子のプロモーター領域に多くの推定転写応答要素が存在することは、P。sajor-cajuのラッカーゼ遺伝子転写の調節におけるこれらの部位の潜在的な役割を示しています。さらに、この研究は、既知のシーケンスから上流に位置する真菌DNA配列をクローンする手法としてのAFR-PCRの潜在的な有用性を示しています。
AIMS: To determine the regulation of laccase isozyme gene transcription in Pleurotus sajor-caju in response to different aromatic inducers and physiological parameters. METHODS AND RESULTS: The promoter regions for each of four different laccase isozymes were cloned from P. sajor-caju, using amplified flanking region-PCR (AFR-PCR). Sequences stretching 724, 214, 840 and 1740 bp upstream from the predicted start codons for lac1, lac2, lac3 and lac4, respectively, were cloned in each case and analysed for the presence of putative transcriptional response elements. A number of putative response elements including metal response elements, xenobiotic response elements and antioxidant response elements appear to be present. In addition putative consensus sequences such as those for the binding of AP1, AP2, creA and NIT2 transcription factors, which are involved in nitrogen and carbon regulation in different fungi, are also present in the promoter regions of some of the isozymes. CONCLUSIONS: These elements may be involved in the transcriptional regulation of laccase gene expression in P. sajor-caju. SIGNIFICANCE AND IMPACT OF THE STUDY: The presence of a number of putative transcriptional response elements in the promoter regions of different isozyme genes indicates a potential role for these sites in regulating laccase gene transcription in P. sajor-caju. In addition this work demonstrates the potential usefulness of AFR-PCR as a technique to clone fungal DNA sequences located upstream from known sequences.
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