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Biological chemistry2003Jul01Vol.384issue(7)

ヒストンは核のフラバン-3-オール(カテキン)の標的ですか?

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

フラバン-3-OLSの核への結合は、tsuga canadensis(針葉樹)の特徴です。これは、DMACA試薬(P-ジメチルアミノ - シンナマルデヒド)で達成されます。これは、ほぼ独占的にモノマーおよびオリゴマーフラバン-3-オールを強い青色で染色します。小腸の子牛細胞にカテキンを加えて濃縮したときに、深部フラバノール染色も発生しました。カテキンに関連する可能性のある核の成分を検出するために、クロマチン(DNA、ヒストン)の主成分をUV-vis分光滴定にかけました。ヒストンH1、H2A、H2B、H3、およびH4を含むDNAまたはヒストン硫酸は、異なるpH値(pH 8.0、7.4、7.0)でカチオン性およびアニオン性緩衝液(Tris、リン酸)に溶解し、EGCG(エピガロカロカテキン酸素)またはカテキンで滴定しました。。結果は、子牛胸腺とカテキンのDNAが調査したことを示しています。ただし、硫酸ヒストンとEGCGまたはカテキンの間に強い関連性複合体がモーゼル図(AとAD図)を使用して見られます。関連性平衡には、特にEGCGによって開始されるヒストンタンパク質の凝集(沈殿)を伴うことができます。滴定平衡は、低い値よりも高いpH値でTRISバッファーで分光的に顕著ですが、リン酸緩衝液では反対の傾向が見られます。驚くべきことに、カテキンは、EGCGとは対照的に、pH範囲7.0-8.0のリン酸緩衝液中のヒストン硫酸塩との相互作用をほとんど示していません。基本的に、カテキンの染色体の標的はクロマチンのヒストンタンパク質のようです。

フラバン-3-OLSの核への結合は、tsuga canadensis(針葉樹)の特徴です。これは、DMACA試薬(P-ジメチルアミノ - シンナマルデヒド)で達成されます。これは、ほぼ独占的にモノマーおよびオリゴマーフラバン-3-オールを強い青色で染色します。小腸の子牛細胞にカテキンを加えて濃縮したときに、深部フラバノール染色も発生しました。カテキンに関連する可能性のある核の成分を検出するために、クロマチン(DNA、ヒストン)の主成分をUV-vis分光滴定にかけました。ヒストンH1、H2A、H2B、H3、およびH4を含むDNAまたはヒストン硫酸は、異なるpH値(pH 8.0、7.4、7.0)でカチオン性およびアニオン性緩衝液(Tris、リン酸)に溶解し、EGCG(エピガロカロカテキン酸素)またはカテキンで滴定しました。。結果は、子牛胸腺とカテキンのDNAが調査したことを示しています。ただし、硫酸ヒストンとEGCGまたはカテキンの間に強い関連性複合体がモーゼル図(AとAD図)を使用して見られます。関連性平衡には、特にEGCGによって開始されるヒストンタンパク質の凝集(沈殿)を伴うことができます。滴定平衡は、低い値よりも高いpH値でTRISバッファーで分光的に顕著ですが、リン酸緩衝液では反対の傾向が見られます。驚くべきことに、カテキンは、EGCGとは対照的に、pH範囲7.0-8.0のリン酸緩衝液中のヒストン硫酸塩との相互作用をほとんど示していません。基本的に、カテキンの染色体の標的はクロマチンのヒストンタンパク質のようです。

Binding of flavan-3-ols to nuclei is characteristic of Tsuga canadensis (coniferous tree). This is achieved with the DMACA reagent (p-dimethylamino-cinnamaldehyde), which stains almost exclusively monomeric and oligomeric flavan-3-ols with an intense blue colour. Deep flavanol staining also occurred when calf cells of small intestine were enriched with added catechins. In order to detect the components of nuclei that may associate with catechins, the principal components of chromatin (DNA, histones) were subjected to UV-VIS spectroscopic titration. DNA or histone sulphate containing the histones H1, H2A, H2B, H3 and H4 were dissolved in cationic and anionic buffers (Tris, phosphate) at different pH values (pH 8.0, 7.4 and 7.0) and titrated with EGCG (epigallocatechin gallate) or catechin. The results show that DNA of calf thymus and the catechins investigated form no spectroscopically detectable association equilibria. However, strong association complexes are found between histone sulphate and EGCG or catechin by means of the Mauser diagrams (A and AD diagrams). The association equilibria can be accompanied by aggregation (precipitation) of histone proteins, especially initiated by EGCG. The titration equilibria are spectroscopically more pronounced in Tris buffers at higher pH values than at lower values, whereas in phosphate buffers the opposite trend is found. Surprisingly, catechin shows nearly no interactions with histone sulphate in phosphate buffers in the pH range 7.0-8.0, which is in contrast to EGCG. Fundamentally, the targets of chromosomes for catechins seem to be the histone proteins of chromatin.

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