ヒト単核細胞におけるアラキドン酸代謝に対するジエチルジチオカルバメート（ディチオカルブナトリウム）の効果グルタチオンペルオキシダーゼ様活性

チオール分娩剤であるジエティルジチオカルバメート（DTC）は、HIV感染患者の原発的日和見感染の頻度を大幅に減らすことが示されています。この治療効果は、HIV感染で発生する酸化ストレスの有害な効果を逆転させるためのDTCの能力に関連しています。アラキドン酸（AA）の酸素化代謝に対するDTCの影響は、マイトジェン刺激ヒト末梢血単核細胞（PBMC）で調査されました。[3H] AAで以前に標識されたPBMCとのインキュベーション時に、コンカナバリンA（CON A）は、30分以内にシクロオキシゲナーゼおよびリポキシゲナーゼ活性を著しく増加させ、トロムボキサンB2（TXB2）およびヒドロキシエイコサテトラエノ酸（HETE）生産で判断しました。[3H] AA血小板の活性化も12-HETE産生を増加させましたが、TXB2合成を誘導しませんでした。マイトロゲンと同時に添加されたDTCのミクロモル濃度は、CON A誘導レベルを超えるHETEの合成を大幅に強化しましたが、TXB2誘導合成は阻害されましたが、DTC濃度は50マイクロームを超えています。リポキシゲナーゼ阻害剤であるノルディヒドログアアアレ酸の存在下で、CON A誘導性のHETESの合成を78％阻害したため、DTCはCON A誘導レベルを超えるHete産生を刺激しなくなりました。逆位相HPLC分析により、CON Aは5、12、および15ヘットのPBMC生産を増加させることが示されました。5ミクロムDTCの存在下では、5-HETE産生が完全に抑制されましたが、15-HETEレベルは著しく強化されました。in vitro実験では、DTCのみが大豆15-リポキシゲナーゼによる15-ヒドロペルオキシエイコサテトラエノ酸（15-HPETE）産生に有意に影響しないことが示されましたが、添加されたグルタチオンの存在下では、DTCは15 HPETEを15-HETEに著しく減少させました。さらに、DTCはグルタチオンペルオキシダーゼ（GPX）アッセイシステムの細胞抽出物を代用することができました。まとめると、これらの結果は、「GPX様」活性を介してDTCがリポキシゲナーゼカスケードを変更できることを示しています。免疫抑制T細胞を刺激することが知られている15 HPETEを選択的に削減する能力は、免疫系に対するその肯定的な調節効果を説明するのに役立つ可能性があります。

Diethyldithiocarbamate (DTC), a thiol delivery agent, has been shown to significantly reduce the frequency of primary opportunistic infections in HIV-infected patients. This therapeutic effect has been related to the capacity of DTC to reverse the deleterious effects of the oxidative stress occurring in HIV infection. The influence of DTC on the oxygenated metabolism of arachidonic acid (AA) was investigated in mitogen-stimulated human peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Upon incubation with PBMC previously labelled with [3H]AA, Concanavalin A (Con A) markedly increased cyclooxygenase and lipoxygenase activities, within 30 min, as judged by thromboxane B2 (TxB2) and hydroxyeicosatetraenoic acid (HETE) production. Con A activation of [3H]AA platelets also increased 12-HETE production but did not induce any TxB2 synthesis. Micromolar concentrations of DTC, added simultaneously with the mitogen, significantly enhanced the synthesis of HETEs above the Con A-induced level while TxB2-induced synthesis was inhibited but only at DTC concentrations higher than 50 microM. In the presence of nordihydroguaiaretic acid, a lipoxygenase inhibitor, which inhibited the Con A-induced synthesis of HETEs by 78%, DTC no longer stimulated HETE production above the Con A-induced level. Reverse phase HPLC analysis showed that Con A increased the PBMC production of 5-, 12- and 15-HETEs. In the presence of 5 microM DTC, 5-HETE production was entirely suppressed whereas the 15-HETE level was markedly enhanced, 12-HETE production by the contaminating platelets remained unchanged. In vitro experiments indicated that DTC alone did not significantly influence 15-hydroperoxyeicosatetraenoic (15-HPETE) production by the soybean 15-lipoxygenase but, in the presence of added reduced glutathione, DTC markedly reduced 15-HPETE into 15-HETE. In addition, DTC was able to substitute for cellular extract in the glutathione peroxidase (GPx) assay system. Taken together, these results indicate that DTC, through its "GPx-like" activity is able to modify the lipoxygenase cascade. Its ability to selectively reduce 15-HPETE known to stimulate immunosuppressive T-cells might help to explain its positive regulatory effect upon the immune system.