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Pbbr1という名前の2.6 kbプラスミドは、Bordetella bronchiseptica s87から分離されました。抗生物質耐性マーカーを挿入した後、このプラスミドは、変換または抱合により、大腸菌、B.Bronchiseptica、B.Bronchiseptica、Vibrio Cholerae、Rhizobium Meliloti、およびPseudomonas putidaに移動する可能性があります。Incpグループ転送機能がTransで提供された場合にのみ、共役が可能でした。非互換性テストで示されているように、PBBR1は、広範囲にわたるRange Incp、IncqまたはIncWグループに属していません。DNA配列分析により、2つのオープンリーディングフレームが明らかになりました。1つはrepと呼ばれ、プラスミドの複製に関与し、もう1つのmobと呼ばれるものが動員に関与していました。MOBのアミノ末端領域とそのプロモーター領域の両方は、グラム陽性細菌のプラスミドからのMOB/プレタンパク質とシーケンスの類似性を示しています。これらの配列の類似性にもかかわらず、PBBR1は、小さなグラム陽性プラスミドで一般的に使用されるローリングサークルメカニズムを介して複製されません。したがって、PBBR1は、グラム陽性生物の動員メカニズムとグラム陰性生物の複製メカニズムを組み合わせる可能性があると推測します。E. coliおよびB. pertussisのプラスミドコピー数の決定は、Pbbr1がかなり高いコピー数を持っていることを示しています。そして、幅広いグラム陰性菌のための新しいクローニングベクターの開発のため。
Pbbr1という名前の2.6 kbプラスミドは、Bordetella bronchiseptica s87から分離されました。抗生物質耐性マーカーを挿入した後、このプラスミドは、変換または抱合により、大腸菌、B.Bronchiseptica、B.Bronchiseptica、Vibrio Cholerae、Rhizobium Meliloti、およびPseudomonas putidaに移動する可能性があります。Incpグループ転送機能がTransで提供された場合にのみ、共役が可能でした。非互換性テストで示されているように、PBBR1は、広範囲にわたるRange Incp、IncqまたはIncWグループに属していません。DNA配列分析により、2つのオープンリーディングフレームが明らかになりました。1つはrepと呼ばれ、プラスミドの複製に関与し、もう1つのmobと呼ばれるものが動員に関与していました。MOBのアミノ末端領域とそのプロモーター領域の両方は、グラム陽性細菌のプラスミドからのMOB/プレタンパク質とシーケンスの類似性を示しています。これらの配列の類似性にもかかわらず、PBBR1は、小さなグラム陽性プラスミドで一般的に使用されるローリングサークルメカニズムを介して複製されません。したがって、PBBR1は、グラム陽性生物の動員メカニズムとグラム陰性生物の複製メカニズムを組み合わせる可能性があると推測します。E. coliおよびB. pertussisのプラスミドコピー数の決定は、Pbbr1がかなり高いコピー数を持っていることを示しています。そして、幅広いグラム陰性菌のための新しいクローニングベクターの開発のため。
A 2.6 kb plasmid, named pBBR1, was isolated from Bordetella bronchiseptica S87. After insertion of an antibiotic resistance marker, this plasmid could be transferred into Escherichia coli, Bordetella pertussis, B. bronchiseptica, Vibrio cholerae, Rhizobium meliloti, and Pseudomonas putida by transformation or conjugation. Conjugation was possible only when the IncP group transfer functions were provided in trans. As shown by incompatibility testing, pBBR1 does not belong to the broad-host-range IncP, IncQ or IncW groups. DNA sequence analysis revealed two open reading frames: one was called Rep, involved in replication of the plasmid, and the other, called Mob, was involved in mobilization. Both the amino-terminal region of Mob and its promoter region show sequence similarities to Mob/Pre proteins from plasmids of Gram-positive bacteria. In spite of these sequence similarities, pBBR1 does not replicate via the rolling-circle mechanism commonly used by small Gram-positive plasmids. We therefore speculate that pBBR1 may combine a mobilization mechanism of Gram-positive organisms with a replication mechanism of Gram-negative organisms. Determination of the plasmid copy number in E. coli and B. pertussis indicated that pBBR1 has a rather high copy number, which, in conjunction with its small size and broad host range, renders it particularly interesting for studies of broad-host-range replicons and for the development of new cloning vectors for a wide range of Gram-negative bacteria.
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