アロ4遺伝子のクローニング、一次構造、および調節、チョロミセスセレビシア科からのチロシン阻害3-デオキシ-D-アラビノ - ヘプロゾン酸-7-リン酸合成酵素をコードする

Saccharomyces cerevisiaeでは、2つの異なる違いがある3-デオキシ-D-アラビノ - ヘプロゾン酸-7-リン酸（DAHP）シンターゼ（DAHP; EC 4.1.2.15）イソザイムは、シキメート経路の最初のステップを実行します。両方の遺伝子の変異は、細胞の正常な成長に十分なDAHPを生成するのに十分なため、芳香族アミノ酸（AA）補助栄養を引き起こすために必要です。フェニルアラニン阻害されたDAHPは、以前に分離され、特徴づけられたARO3遺伝子によってコードされます。ここでは、チロシンによって阻害される2番目のDAHPをコードするARO4遺伝子のクローニングと特性評価を報告します。ARO4遺伝子産物のAA配列は、ARO3でエンコードされたアイソザイムと76％の類似性を明らかにし、大腸菌の3つのDAHPSアイソザイムと66および73％を明らかにしています。ARO4遺伝子発現は、AA生合成の一般的な制御システムによって調節されています。ARO3遺伝子の場合のように、プロモーターの単一のGCN4認識要素は、AA飢vation条件下でのARO4遺伝子の抑制に関与します。ただし、等遺伝子の状況とは対照的に、ARO3、GCN4は、非表示条件下でのARO4転写の基礎レベルに寄与しません。

In Saccharomyces cerevisiae, two differently regulated 3-deoxy-D-arabino-heptulosonate-7-phosphate (DAHP) synthase (DAHPS; EC 4.1.2.15) isoenzymes carry out the first step in the shikimate pathway. Mutations in both genes are necessary to cause aromatic amino acid (aa) auxotrophy, since one isoenzyme alone is sufficient to produce enough DAHP for normal growth of the cells. The phenylalanine-inhibited DAHPS is encoded by the previously isolated and characterized ARO3 gene. Here, we report the cloning and characterization of the ARO4 gene, encoding the second DAHPS, which is inhibited by tyrosine. The aa sequence of the ARO4 gene product reveals 76% similarity to the ARO3-encoded isoenzyme and 66 and 73% to the three DAHPS isoenzymes from Escherichia coli. ARO4 gene expression is regulated by the general control system of aa biosynthesis. As in the case of the ARO3 gene, a single GCN4-recognition element in the promoter is responsible for derepression of the ARO4 gene under aa starvation conditions. However, in contrast to the situation in the isogene, ARO3, GCN4 does not contribute to the basal level of ARO4 transcription under nonderepressing conditions.