熱応答性ポリマー表面の細胞培養

コラーゲンと共役することにより、ヒト真皮線維芽細胞の培養の基質として、熱応答性ポリマーであるポリ-N-イソプロピルアクリルアミド（PNI-PAAM）を使用しました。細胞はしっかりと付着し、広がり、基質上に成長し、ポリマーが細胞に向かって毒性がないことを示しています。Pnipaamは、より低い臨界溶液温度（LCST;約32度C）上の水に不溶性であり、LCSTの下で可逆的に可溶化されます。この変換を活用して、LCSTを介してPnipaamを含む基板上で培養された単層線維芽細胞は、トリプシンやEDTAなどの従来のデタッチ剤を使用せずに、LCST以下の温度を単に下げることにより、基板から完全に取り外しました。剥離したセルシートは徐々に凝集し、最終的に多細胞スフェロイドを形成しました。このポリマーは、細胞培養に便利で潜在的に有用な技術を提供する可能性があります。

We have used a thermo-responsive polymer, poly-N-isopropyl acrylamide (PNI-PAAm), as a substratum for the culture of human dermal fibroblasts by conjugating it with collagen. The cells attached well, spread, and grew on the substratum, indicating that the polymer has no toxicity towards the cells. PNIPAAm is insoluble in water over the lower critical solution temperature (LCST; about 32 degrees C) and reversibly solubilized below the LCST. Taking advantage of this conversion, monolayered fibroblasts cultured on the substratum containing the PNIPAAm over the LCST, were completely detachable from the substratum by simply lowering the temperature below the LCST, without the use of conventional detaching agents such as trypsin and EDTA. The detached cell sheet gradually aggregated and finally formed a multicellular spheroid. This polymer may provide a convenient and potentially useful technology for cell culture.