筋無力筋からのアセチルコリン受容体反応性T細胞によるT細胞受容体Vベータ遺伝子の優先的使用

実験的自己免疫性筋重症（EAMG）は、自己免疫の現在の概念と自己免疫疾患の新規免疫療法をテストするための重要なモデルです。EAMG自己抗原であるアセチルコリン受容体（ACHR）は、構造的および免疫学的に複雑であり、オリゴクローナルT細胞集団を対象とした治療戦略の適用に対する潜在的な障害です。EAMGにおけるT細胞エピトープ認識のクローン不均一性が予想外に限られていることを以前に示したように、TCR Vベータ発現を調べました。ACHRプライミングリンパ節T細胞と、EAMG感受性C57BL/6（B6; H-2B、MLS-1B）マウスからの確立されたACHR反応性T細胞クローンは、TCRのTCR Vベータ6セグメントの優先的な利用を示しました。in vivoプライミングとin vitroの再刺激後、ACHRまたは免疫力素エピトープを持つ合成ペプチドで7日間、Vベータ6発現リンパ節細胞（LNC）を数倍に拡大し、回収された実行可能なCD4+細胞の最大75％を占めました。B6.C-H-2BM12（BM12; H-2BM12、MLS-1B）マウスのLNCは、ACHRに応答して増殖しましたが、B6免疫陽性ペプチドに応答して増殖し、Vベータ6+細胞の拡大に失敗しました。非免疫性BM12およびB6動物は、Vベータ6+ LNCの数が類似しているため（4-5％）、Ag/MHC複合体のTCR認識の構造的要件がVベータ使用量を決定することを示唆しています。（B6 x BM12）F1動物のT細胞間のペプチド反応性とVベータ6発現に関する結果は、ネガティブな選択や耐性ではなく、構造機能関係がB6とBM12のひずみの違いを説明することを示唆しました。ACHR、CB6F1（H-2BXD、MLS-1B、Vベータ6発現）およびB6D2F1（H-2BXD、MLS-1AXB; Vベータ6-デレート）に対するT細胞応答に対するVベータ6+細胞の胸腺陰性選択の潜在的な影響を調べるために、ACHRおよびPpeptide ractivitivity and V beta 6の株を分析しました。両方のF1株はACHRに対してよく反応しましたが、ペプチドに対するB6D2F1マウスの反応はCB6F1と比較して大幅に減少しました。ペプチド反応性B6D2F1 LNCの短期および長期培養は、残留Vベータ6+細胞の拡大を示さなかったが、CB6F1 LNCの同様の培養は60％以上のVベータ6+細胞で構成されていた。F1株の結果はさらに、ペプチドのT細胞レパートリーが非常に拘束されており、非Vベータ6発現細胞がペプチドを認識できるVベータ6+ TCRのMLSを介した負の選択を部分的に克服できることを示しています（400語で切り捨てられた抽象化）

Experimental autoimmune myasthenia gravis (EAMG) is an important model for testing current concepts in autoimmunity and novel immunotherapies for autoimmune diseases. The EAMG autoantigen, acethylcholine receptor (AChR), is structurally and immunologically complex, a potential obstacle to the application of therapeutic strategies aimed at oligoclonal T cell populations. Inasmuch as we had previously shown that the clonal heterogeneity of T cell epitope recognition in EAMG was unexpectedly limited, we examined TCR V beta expression. AChR primed lymph node T cells and established AChR reactive T cell clones from EAMG-susceptible C57BL/6 (B6; H-2b, Mls-1b) mice showed preferential utilization of the TCR V beta 6 segment of the TCR. After in vivo priming and in vitro restimulation for 7 days with AChR or a synthetic peptide bearing an immunodominant epitope, V beta 6 expressing lymph node cells (LNC) were expanded several-fold, accounting for up to 75% of recovered viable CD4+ cells. The LNC of B6.C-H-2bm12 (bm12; H-2bm12, Mls-1b) mice, which proliferated in response to AChR but not to the B6 immunodominant peptide, failed to expand V beta 6+ cells. Inasmuch as nonimmune bm12 and B6 animals had similar numbers of V beta 6+ LNC (4-5%), this suggested that structural requirements for TCR recognition of Ag/MHC complexes dictated V beta usage. Results concerning peptide reactivity and V beta 6 expression among T cells from (B6 x bm12)F1 animals also suggested that structure-function relationships, rather than negative selection or tolerance, accounted for the strain differences between B6 and bm12. To examine the potential effects of thymic negative selection of V beta 6+ cells on the T cell response to AChR, CB6F1 (H-2bxd, Mls-1b; V beta 6-expressing) and B6D2F1 (H-2bxd, Mls-1axb; V beta 6-deleting) strains were analyzed for AChR and peptide reactivity and V beta 6 expression. Both F1 strains responded well to AChR but the response of B6D2F1 mice to peptide was significantly reduced compared to CB6F1. Short and long term cultures of peptide-reactive B6D2F1 LNC showed no expansion of residual V beta 6+ cells, although similar cultures of CB6F1 LNC were composed of more than 60% V beta 6+ cells. The results from the F1 strains further indicated that the T cell repertoire for peptide was highly constrained and that non-V beta 6 expressing cells could only partially overcome Mls-mediated negative selection of V beta 6+ TCR capable of recognizing peptide.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)