ペリプラズムリジン、アルギニン、オルニチン結合タンパク質（LAO）の精製と特性評価Salmonella Typhimurium

サルモネラTyphimuriumのリジン、アルギニン、オルニチン結合タンパク質（LAO）は、均一に精製され、特徴付けられています。解離定数（KD）は、それぞれL-アルギニン、L-リジン、およびL-ウルニチンの平衡透析アッセイによって決定されました。L-ヒスチジンは比較的優れたリガンドであることがわかった（KD、500 nm）。リガンドされたラオスからのリガンドの分離、結合リガンドの推定、および未確認のLAOの方法の方法が開発されています。リガンド化されていないリガンドラオは、異なるUVスペクトルを持つことが示されています。UVスペクトルは、基質の性質によっても異なります。基質類似体による阻害研究により、リガンド結合ポケットの性質を理解するのに役立つ情報が得られました。

The lysine-, arginine-, ornithine-binding protein (LAO) from Salmonella typhimurium has been purified to homogeneity and characterized. The dissociation constants (KD) were determined by equilibrium dialysis assay to be 14, 15, and 29 nM for L-arginine, L-lysine, and L-ornithine respectively. L-Histidine was found to be a relatively good ligand (KD, 500 nM). Methods have been developed for the separation of liganded from unliganded LAO, for the estimation of bound ligand, and for unliganding LAO. Liganded and unliganded LAO are shown to have distinct UV spectra. The UV spectrum also varies with the nature of the substrate. Inhibition studies with substrate analogs yielded information useful for understanding the nature of the ligand-binding pocket.