アポトーシス促進性サイトカインの調節化合物で治療された骨髄性腫瘍症候群の患者のアポトーシス率

過剰なアポトーシスは、骨髄異形成症候群（MDS）における効果のない造血において中心的な役割を果たします。この研究の目的は、MDS患者におけるアポトーシスとBcl-2発現を定量化し、プロアポトーシスサイトカインを調節する化合物による治療効果の評価にこれらのパラメーターを使用することでした。8人のMDS患者の骨髄（BM）サンプルが研究されました。4人は難治性貧血を伴い、4人は鳴り響き型サイド芽細胞を伴う耐衝撃性貧血を伴う4人です。BM測定のないホジキン疾患の2人の患者が対照のために研究されました。治療は、ペントキシフィリン、デキサメタゾン、シプロフロキサシンの投与で構成されていました。アポトーシスおよびBcl-2の生化学的アッセイは、それぞれアネキシンV-ビオチンコンジュゲート抗体と抗ヒトBcl-2抗体を使用して実施し、続いてストレプトアビジン - ペロキシダーゼコンジュゲート、およびペルオキシダーゼ基質を使用しました。BMサンプルの超微細構造調査は、標準的な電子顕微鏡法で実施されました。MDS患者のBM造血細胞のほとんどは、クロマチン凝縮とマーギネーション、細胞質凝縮、核および原形質膜の出芽を含むアポトーシスのさまざまな段階の超微細構造的特徴を持っていました。Bcl-2発現は、アポトーシスプロセスの速度と逆相関を示しました。これら2つのパラメーターの定期的な評価により、治療に反応した患者のBcl-2発現の増加とアポトーシス率の減少が示されました。治療への対応は、輸血のニーズに従って評価されました。治療効率は時間内に低下しました。アポトーシスの速度は、Bcl-2発現のレベルと逆相関していました。これらの結果は、MDS治療の監視におけるアポトーシスプロセス評価の重要性を裏付けています。

Excessive apoptosis has a central role in ineffective hematopoiesis in myelodysplastic syndrome (MDS). The aim of the study was to quantify apoptosis and Bcl-2 expression in patients with MDS and to use these parameters in the evaluation of treatment efficacy with compounds modulating proapoptotic cytokines. Bone marrow (BM) samples from eight MDS patients were studied: four with refractory anemia and four with refractory anemia with ringed sideroblasts. Two patients with Hodgkin disease without BM determination were studied for control. Therapy consisted in administration of pentoxyphylline, dexamethasone and ciprofloxacin. Biochemical assay of apoptosis and Bcl-2 was performed using annexin V-biotin conjugate antibody and anti-human Bcl-2 antibody respectively, followed by streptavidine-peroxidase conjugate, and peroxidase substrate. Ultrastructural investigation of BM samples was performed with standard electron microscopy techniques. Most of BM hematopoietic cells in the MDS patients had ultrastructural features of various stages of apoptosis including chromatin condensation and margination, cytoplasm condensation and budding of nuclear and plasma membranes to produce apoptotic bodies. Bcl-2 expression showed an inverse correlation with the rate of the apoptotic process. Periodic evaluation of these two parameters has shown an increase of Bcl-2 expression and a decrease of apoptotic rate in patients who had responded to the treatment. Response to the treatment was appreciated in accordance with their transfusion needs. Treatment efficiency diminished in time. The rate of apoptosis was inversely correlated with the level of Bcl-2 expression. These results confirm the importance of the apoptotic process evaluation in monitoring MDS treatment.