変異体LOXPペアLOX66/LOX71を使用したマウスの一方向CRE媒介遺伝的反転

CRE/LOXP組換えシステムは、LOXPフランクDNAセグメントの削除または反転により条件付き方法でマウスゲノムを変更するための一般的に使用されるツールです。CREを介した欠失は本質的に単方向ですが、反転は可逆的であるため、CREを構成する細胞の遺伝子機能の安定した変化を許可しません。部位指向の変異誘発により、好ましい前方反応平衡を示す非対称LOXP部位（LOX66およびLOX71）が得られました。ここでは、LOX66/LOX71が、in vivoで誘導性または細胞型特異的Cre-Transgenesと組み合わせたマウスゲノムを標的とするスイッチ基質の効率的かつ主に一方向の反転を媒介することを実証します。

The Cre/loxP recombination system is a commonly used tool to alter the mouse genome in a conditional manner by deletion or inversion of loxP-flanked DNA segments. While Cre-mediated deletion is essentially unidirectional, inversion is reversible and therefore does not allow the stable alteration of gene function in cells that constitutively express Cre. Site-directed mutagenesis yielded a pair of asymmetric loxP sites (lox66 and lox71) that display a favorable forward reaction equilibrium. Here, we demonstrate that lox66/lox71 mediates efficient and predominantly unidirectional inversion of a switch substrate targeted to the mouse genome in combination with either inducible or cell type-specific cre-transgenes in vivo.