野生のマウス種からの組換え非生成マウス白血病ウイルスの特性

一般的な実験室株に最も密接に関連する野生のマウス種には、マウス白血病ウイルス（MLV）の外国性/ポリトロピックサブグループのプロビラルENV遺伝子が含まれています。Mus spretusのポリトロピックプロミュロスに官能遺伝子が含まれているかどうかを判断するために、Moloney MLV（MOMLV）またはAmphotropic MLV（A-MLV）に新生児を接種し、宿主範囲が変化したウイルス組換え体のためにスクリーニングされました。これらの細胞はMOMLVの複製を支持せず、A-MLV接種マウスの細胞をフェレット細胞に播種したため、MomLV接種マウスの胸腺および脾臓細胞をMUS Dunni細胞およびMink細胞に播種しました。すべてのMOMLV接種マウスは、MOMLVの前駆細胞に似た生態系ウイルスを生成しましたが、MOMLVとは異なり、M。dunni細胞では高い力価に成長しました。すべてのMOMLV接種マウスは、Mink細胞に感染性のある非製品ウイルスも生成しました。3つのMOMLVおよび2つのA-MLV由来の非エコトロピック組換え剤の配列決定により、これらのウイルスには、表面（SU）タンパク質をコードするENVの領域と膜貫通（TM）タンパク質の5 '末端を含む実質的な置換が含まれていることが確認されました。A-MLV組換え剤の1つの5 '組換えブレークポイントは、RNase Hで同定されました。制限付きホスト範囲。これらの組換え体に寄与するM. spretusプロビロスも配列決定されました。7つのシーケンスされたプロミュラスは、互いに組換えと99％同一でした。明らかな致命的な欠陥があるのは7人のうち2人だけでした。M. spretusプロビロスは、最近の生殖系統の獲得である可能性が高く、複製能力のあるウイルスの生成に寄与する機能的遺伝子が含まれていると結論付けています。

The wild mouse species most closely related to the common laboratory strains contain proviral env genes of the xenotropic/polytropic subgroup of mouse leukemia viruses (MLVs). To determine if the polytropic proviruses of Mus spretus contain functional genes, we inoculated neonates with Moloney MLV (MoMLV) or amphotropic MLV (A-MLV) and screened for viral recombinants with altered host ranges. Thymus and spleen cells from MoMLV-inoculated mice were plated on Mus dunni cells and mink cells, since these cells do not support the replication of MoMLV, and cells from A-MLV-inoculated mice were plated on ferret cells. All MoMLV-inoculated mice produced ecotropic viruses that resembled their MoMLV progenitor, although some isolates, unlike MoMLV, grew to high titers in M. dunni cells. All of the MoMLV-inoculated mice also produced nonecotropic virus that was infectious for mink cells. Sequencing of three MoMLV- and two A-MLV-derived nonecotropic recombinants confirmed that these viruses contained substantial substitutions that included the regions of env encoding the surface (SU) protein and the 5' end of the transmembrane (TM) protein. The 5' recombination breakpoint for one of the A-MLV recombinants was identified in RNase H. The M. spretus-derived env substitutions were nearly identical to the corresponding regions in prototypical laboratory mouse polytropic proviruses, but the wild mouse infectious viruses had a more restricted host range. The M. spretus proviruses contributing to these recombinants were also sequenced. The seven sequenced proviruses were 99% identical to one another and to the recombinants; only two of the seven had obvious fatal defects. We conclude that the M. spretus proviruses are likely to be recent germ line acquisitions and that they contain functional genes that can contribute to the production of replication-competent virus.