HU1D10は、ヒト慢性リンパ性白血病細胞におけるAKT生存経路の活性化と同時にアポトーシスを誘導します

1D10抗原は、現在血液悪性腫瘍のための臨床試験中のヒト化HLA-DRベータ鎖特異的抗体であるHu1D10（アポリズマブ）の標的です。Hu1D10は、原発性慢性リンパ性白血病（CLL）細胞における二次架橋後のカスパーゼ非依存性アポトーシスを誘導することを実証します。SykとAktのリン酸化によって証明されるように、反応性酸素種（ROS）とシグナル伝達の生成が認められました。Hu1D10誘発ROSの源は、ミトコンドリア呼吸鎖に操作された欠陥を持つRajiリンパ芽球細胞株を使用して検査されました。ミトコンドリア呼吸不足を伴うクローンのHu1d10治療は、細胞質源を示唆するROSを生成しました。HU1D10治療前の原発性CLL細胞へのROSスカベンジャーの投与により、Akt活性化が減少しました。Hu1D10およびホスファチジルイノシトール3-キナーゼ阻害剤LY294002による治療は、アポトーシスの強化を伴うin vitro相乗効果を示しました。進行中の臨床試験と併せて、Hu1D10の静脈内注入後に血液サンプルを収集し、Aktのリン酸化について分析しました。3つの患者サンプルのうち2つは、Hu1D10投与後のAktリン酸化の持続的な増加を示しました。これらのデータは、CLL細胞におけるHu1D10の結紮が、Hu1D10と開発中の他のクラスII抗体の両方の効率を大幅に向上させるように併用療法を設計する可能性のある死と生存シグナルを誘導することを示唆しています。

The 1D10 antigen is the target for Hu1D10 (apolizumab), a humanized HLA-DR beta-chain-specific antibody that is currently in clinical trials for hematologic malignancies. We demonstrate that Hu1D10 induces caspase-independent apoptosis following secondary cross-linking in primary chronic lymphocytic leukemia (CLL) cells. Generation of reactive oxygen species (ROS) and signal transduction, as evidenced by phosphorylation of Syk and AKT, were noted. The source of the Hu1D10-induced ROS was examined using the Raji lymphoblastic cell line with engineered defects in the mitochondrial respiratory chain. Hu1D10 treatment of clones with deficient mitochondrial respiration produced ROS suggesting a cytoplasmic source. Administration of ROS scavengers to primary CLL cells prior to Hu1D10 treatment diminished AKT activation. Treatment with Hu1D10 and the phosphatidylinositol 3-kinase inhibitor LY294002 demonstrated in vitro synergy with enhanced apoptosis. In conjunction with an ongoing clinical trial, blood samples were collected following intravenous infusion of Hu1D10 and analyzed for phosphorylation of AKT. Two of 3 patient samples showed a sustained increase in AKT phosphorylation following Hu1D10 administration. These data suggest that Hu1D10 ligation in CLL cells induces death and survival signals for which combination therapies may be designed to greatly enhance efficiency of both Hu1D10 and other class II antibodies in development.