ナイーブとクローン化されたCD4+ T細胞の抗原特異的およびMHC制限されたアネルギー誘導に対する微分感受性

T細胞のアネルギーは、クローン化されたCD4（+）T細胞で異なる条件下で首尾よく誘導されていますが、in vivoでのT細胞アネルギーの誘導は困難で議論の余地があります。定義された抗原に対して特異性を持つ天然のT細胞集団の頻度が低いため、実験データの解釈を複雑にする事前のin vivoプライミングなしで、ナイーブT細胞のエネルギーを研究することは非常に困難です。この問題を解決するために、均一な抗原特異的CD4（+）T細胞集団を持つHNT-TCRトランスジェニックマウスを採用しました。この研究では、HNT-TCRトランスジェニックマウスからインフルエンザウイルスヘマグルチニン（HA）ペプチド特異的CD4（+）T細胞クローンを生成し、架橋剤であるECDI（1-エチル-3--で処理したAPCを使用してアネルギーを誘導しました。3（3-ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド）。ECDI処理APCおよびHAペプチド抗原で処理した後、クローン化されたまたは新鮮に精製されたナイーブCD4（+）トランスジェニックT細胞の増殖反応は、アネルギー誘導の指標として監視されました。結果は、クローン化されたHNT-TCRトランスジェニックCD4（+）T細胞でアネルギーが正常に誘導されることを示しました。誘導されたアネルギーは抗原およびMHC特異的であると判断されました。対照的に、同じ条件下で新たに精製されたナイーブCD4（+）トランスジェニックT細胞ではアネルギーは観察されませんでした。結果は、ナイーブCD4（+）T細胞が異なるアネルギー誘導要件を持っている可能性があること、またはクローン化されたCD4（+）T細胞が特定のプライミングまたはin vitroクローニングアーティファクトを持つ可能性があることを示唆しています。T細胞アネルギーの誘導は、T細胞の成長、活性化、分化状態またはクローニング条件に依存する可能性があることを提案します。本研究の結果は、in vivoでのT細胞アネルギー誘導の基礎となるメカニズムの研究と、免疫耐性ベースの療法の応用に重要な意味を持つ可能性があります。

T cell anergy has been successfully induced under different conditions in cloned CD4(+) T cells, but induction of T cell anergy in vivo has been difficult and controversial. Due to the low frequency of naturally occurring T cell population with specificity to a defined antigen, it is very difficult to study anergy of naïve T cells without prior in vivo priming which complicates the interpretation of experimental data. To solve this problem, we adopted the HNT-TCR transgenic mice which have homogeneous antigen specific CD4(+) T cell population. In this study, we generated an influenza virus hemagglutinin (HA) peptide-specific CD4(+) T cell clone from the HNT-TCR transgenic mice and induced anergy using APCs which were treated with the crosslinker, ECDI (1-ethyl-3-3(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide). The proliferative response of the cloned or freshly purified naïve CD4(+) transgenic T cells after treatment with ECDI-treated APCs and the HA peptide antigen was monitored as the index of anergy induction. The results showed that anergy was successfully induced in the cloned HNT-TCR transgenic CD4(+) T cells. It was determined that the induced anergy was antigen- and MHC-specific. By contrast, anergy was not observed in freshly purified naïve CD4(+) transgenic T cells under the same conditions. The results suggest that naïve CD4(+) T cells may have different anergy inducing requirements, or that cloned CD4(+) T cells may have certain priming or in vitro cloning artifact which makes them more susceptible to anergy induction. We propose that induction of T cell anergy may depend on the T cell growth, activation and differentiation state or cloning conditions. The results from the present study may have important implications for the study of the mechanism(s) underlying T cell anergy induction in vivo and for applications of immune tolerance based therapy.