システニル - ロイコトリエン受容体の選択されたリガンドの逆アゴニスト活性1

システニル白血球（Cyslts）は、喘息を含むいくつかの炎症プロセスに関連しています。この関連により、CYSLT受容体への拮抗薬の開発にかなりの努力が投資されてきました（CYSLT（1）R）。これらの分子の多くは、Cyslt（1）Rと特異的に相互作用することが示されていますが、受容体の立体構造とその活性に対する影響についてはほとんど知られていません。私たちは、拮抗薬の逆アゴニスト活動の可能性に特に興味がありました。ヒトCyslt（1）Rおよび野生型（WT）受容体の構成的活性変異体（N106A）を使用して、三量体Gタンパク質のG（アルファク）サブユニットと共発現すると、この問題に一般的に使用されるリガンドでこの問題に対処することができました。治療中。これらの分子のいくつかは逆アゴニストであるが、他の分子は部分的なアゴニストとして作用することを実証しました。Zafirlukast、Zafirlukast、3- [[3-（7-クロロキノリン-2-イル）フェニル]にさらされたCyslt（1）r変異N106Aを発現する細胞では] - （2-ジメチルカルバモイレチルエチルスルファニル）メチルスルファニル]プロピオン酸酸（MK571）、基底イノシトールリン酸産生は減少しましたそれぞれ53 +/- 6、44 +/- 3、および54 +/- 4％。一方、6（r） - （4-カルボキシフェニルチオ）-5（s）-5（s）-hydroxy-7（e）、9（e）、11（z）、14（z） - eicosatetraeno酸（bayu9773）および1- [2-ヒドロキシ-3-プロピル-4- [4-（1H-テトラゾール-5-イル） - ブトキシ] - フェニルEthanone]（LY171883）は、部分的なアゴニストとアルファペンチル-3- [2-キノリニルメトキシ]ベンジルアルコール（Rev 5901）として、中性拮抗薬として作用しました。しかし、Cyslt（1）RおよびG（Alphaq）を発現する細胞では、使用されたすべての拮抗薬は逆アゴニスト活性を有していました。逆アゴニスト活性を持つリガンドによる基底イノシトールリン酸産生の減少は、より中性拮抗薬によって阻害され、反応の特異性を確認することができます。ここでは、Montelukast、Mk571、およびZafirlukastがヒトCyslt（1）受容体の逆アゴニストとして作用できることを実証します。

Cysteinyl leukotrienes (CysLTs) are associated with several inflammatory processes, including asthma. Due to this association, considerable effort has been invested in the development of antagonists to the CysLT receptors (CysLT(1)R). Many of these molecules have been shown to specifically interact with CysLT(1)R, but little is known about their impact on the conformation of the receptor and its activity. We were especially interested in possible inverse agonist activity of the antagonists. Using a constitutively active mutant (N106A) of the human CysLT(1)R and the wild-type (WT) receptor coexpressed with the G(alphaq) subunit of the trimeric G protein, we were able to address this issue with ligands commonly used in therapy. We demonstrated that some of these molecules are inverse agonists, whereas others act as partial agonists. In cells expressing the CysLT(1)R mutant N106A exposed to Montelukast, Zafirlukast, or 3-[[3-[2-(7-chloroquinolin-2-yl)vinyl]phenyl]-(2-dimethylcarbamoylethylsulfanyl)methylsulfanyl] propionic acid (MK571), the basal inositol phosphate production was reduced by 53 +/- 6, 44 +/- 3, and 54 +/- 4%, respectively. On the other hand, 6(R)-(4-carboxyphenylthio)-5(S)-hydroxy-7(E),9(E),11(Z),14(Z)-eicosatetraenoic acid (BayU9773) and 1-[2-hydroxy-3-propyl-4-[4-(1H-tetrazole-5-YL)-butoxy]-phenyl ethanone] (LY171883) acted as partial agonists and alpha-pentyl-3-[2-quinolinylmethoxy] benzyl alcohol (REV 5901) as a neutral antagonist. However, in cells expressing CysLT(1)R and G(alphaq), all antagonists used had inverse agonist activity. The decrease in basal inositol phosphate production by ligands with inverse agonist activity could be inhibited by a more neutral antagonist, confirming the specificity of the reaction. We demonstrate here that Montelukast, MK571, and Zafirlukast can act as inverse agonists on the human CysLT(1) receptor.