熱アルカルフィリックバチルスSP株Ta2a1からのF1F0-ATPシンターゼのためのATPオペロンエンコードのクローニングと分子特性評価

Bacillus sp。Ta2.A1株は、3つのオーバーラップフラグメントとしてクローン化され、配列決定されました。9つの遺伝子は、それぞれi、a、c、b、delta、alpha、gamma、beta、およびepsilonサブユニットをコードする遺伝子秩序Atpibefhagdcを備えたオペロンで組織されました。ノーザンブロット分析では、ATPオペロンのサイズに対応する約7.2 kBの最大転写産物が示され、9つの遺伝子が単一のポリシストリックメッセージとして転写されることが示されました。アルカリフィリック特異的残基Lys（218）およびGly（245）は、ta2.A1株のサブユニットで保存されていました。EpsilonサブユニットのC末端ドメインの分析では、Ta2.A1株からベータサブユニットのDelsded Motifとの強い静電的相互作用を形成すると予測される塩基性残基のいくつかのクラスターを示し、この酵素の閉塞を説明するかもしれません。ATP加水分解方向。

The genes encoding the subunits for the F(1)F(0)-ATP synthase from Bacillus sp. strain TA2.A1 were cloned as three overlapping fragments and sequenced. The nine genes were organized in an operon with the gene order atpIBEFHAGDC encoding the i, a, c, b, delta, alpha, gamma, beta, and epsilon subunits, respectively. Northern blot analysis showed a maximum transcript of approximately 7.2 kb, which corresponds to the size of the atp operon and demonstrated that the nine genes are transcribed as a single polycistronic message. The alkaliphilic-specific residues Lys(218) and Gly(245) were conserved in subunit a of strain TA2.A1. Analysis of the C-terminal domain of the epsilon subunit showed several clusters of basic residues which are predicted to form a strong electrostatic interaction with the DELSDED motif in the beta subunit from strain TA2.A1, and may explain the blockage of this enzyme in the ATP hydrolysis direction.